应用噬菌体展示技术筛选乙型肝炎病毒核心启动子结合蛋白

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaokun787
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:乙型肝炎病毒(HBV)是一种严重危害人类健康的致病因子。在我国,它是导致肝炎、肝硬化、肝细胞癌的主要原因。HBV 属嗜肝DNA 病毒,其基因组为3.2kb 部分双链的环状DNA。HBV 基因组的功能单位十分密集,高度压缩,重复利用。HBV 核心启动子(HBV Core promoter,CP)在HBV 的转录和复制上起重要作用,指导前基因组mRNA 和前核心mRNA 转录。由于病毒基因的表达与调控是研究病毒复制的核心问题,所以本文旨在通过研究与HBV CP 结合的肝细胞特异性蛋白质因子,进一步了解HBV CP 在病毒致病过程中的作用。方法:根据文献报道设计上下游引物,采用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)技术克隆了HBV CP 的基因片段,将其与氯霉素乙酰转移酶(Chloramphenicol acetyltransfe -rase,CAT 报告基因载体连接,构建了重组报告基因载体pCAT-CP,转染人肝癌细胞系HepG2,同时转染实验室保存的不同的HBV CP 变异株, 用酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测氯霉素乙酰转移酶的表达,验证其活性。以此结论为基础,我们应用噬菌体展示技术筛选HBV CP结合蛋白基因,以HBV CP PCR产物作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA 文库进行4 轮“吸附-洗脱-扩增”筛选过程,将第4 轮阳性噬斑裂解液
其他文献
目的:研究提高综合医院对抑郁症的识别能力的必要性.方法:在2 014年10月到201 5年1 0月期间,选取本院46名医师作为研究对象,通过实践调查研究的方式明确综合医院对抑郁症的识
目的:探讨格林-巴利综合征的临床康复治疗方法及效果.方法:选取2012年1月-2015年5月我院神经内科收治入院的96例GBS患者,随机分为两组,各组48例,对照组行常规药物对症治疗,观
本文介绍了医院供应室以及加强院供应室消毒和灭菌管理的重要性,从供应室污染区、清洁区和物品存放区域管理;消毒和灭菌措施以及消毒和灭菌质量监测管理三个方面分析了医院供
合理用药是提高医疗质量、减轻药物毒副作用以确保安全和缓解“看病贵”的重要措施之一.近几年来,由于多种原因使药物滥用现象比较严重,如何加强合理用药管理是摆在医院管理
目的:探讨选择真武汤加减+生脉注射液对肺心病心力衰竭患者完成治疗后获得的临床效果.方法:选择我院2014年03月-2016年03月肺心病心力衰竭患者84例作为本次实验研究对象.根据
目的:分析支气管肺炎行喜炎平注射液疗法的效果.方法:调查对象从我院收治患者中抽选,随机抽样后将140例分成两组:对照组行病毒唑疗法,研究组于对照组上加喜炎平注射液,治疗后
痛风是我国高发的一种代谢性疾病,其生化基础为高尿酸血症,主要由嘌呤代谢异常引发.当前,痛风临床治疗以西药为主,但是西药促排酸药物及抑制尿酸生成药物对副反应较多,故在临
医院政工干部作为医院队伍建设的重要组织部分,对于医院的管理、思想政治工作和行政后勤保障具有重要作用,因此,必须大力加强医院政工干部的道德修养.一是提高对道德修养的深
目的:  探究能谱CT在肌肉骨关节系统肿瘤及肿瘤样病变诊断及鉴别肿瘤成份中的可行性。  方法:  本研究在通过医院伦理委员会批准的前提下,获得患者知情同意。分析2013年7
三叶青为我国特有的药用植物,近年来得到了学术界广泛的研究.本文针对近年来对三叶青的化学成分及药理作用的研究进行了总结,为今后三叶青资源的进一步开发和利用提供依据.