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本文测试研究了胶州湾近岸李村河、海泊河入海口沉积物中氮、磷及重金属含量,以石老人近岸沉积物作为对照,对其污染状况与该生境半知菌种群数量进行了统计分析。结果表明,李村河入海口综合污染最为严重。沉积物中可培养半知菌数量随着污染程度增加而减少,这种变化与重金属污染的相关性较强。从胶州湾污染区域的沉积物样品中,筛选获得1株对重金属元素反应敏感的菌株,经鉴定为灰黄青霉(Penicillium griseofulvum),对该菌株在重金属胁迫下的生物学特征及酶活变化进行了研究。结果表明,一定量的重金属铜、锌离子对菌株产生显著的影响,并通过形态与色素变化的方式表现出来。当培养基中Cu2+为125 mg/L,Zn2+浓度为800 mg/L时,孢子萌发会完全受到抑制,同时菌丝也发生严重变异。菌株色素随着Cu2+的增加呈现从灰绿色到浅黄色的颜色变化,随着Zn2+的增加呈现从灰绿色到白色的颜色变化。在菌株生长的离子浓度范围内,少量的Cu2+能提高CAT、GOD酶和金属硫蛋白的活性作用,25 mg/L Cu2+时活性作用最强。在25 mg/L至75 mg/L,随着Cu2+浓度的增加,活性作用逐渐减弱,浓度增加至100 mg/L时菌株不能生长。而在Zn2+浓度为100 mg/L至400 mg/L的培养基中,CAT、GOD酶和金属硫蛋白的活性作用随着Zn2+浓度的增加逐渐增强,400 mg/L Zn2+时酶活作用最强。Zn2+浓度增加至600 mg/L时菌株不能生长。根据GeneBank中青霉属不同种和相近属种的ITS序列差异和特有的IAO序列,设计了灰黄青霉的特异性引物AS1/RS4和IAO1/IAO2,由此建立的PCR检测体系可以从灰黄青霉菌株中扩增到目的特异性片段,而扩增其他近似或相关菌株时没有相应的特异性片段。利用引物AS1/RS4,通过套式PCR将菌株基因组DNA的检测灵敏度至少提高了103倍。当沉积物中菌株的分生孢子达到102个数量级孢子/0.25 g土时可检测出。进一步利用此检测体系对胶州湾近海沉积物DNA样品进行检测,均能快速稳定的检测出目的片段。而利用引物IAO1/IAO2对菌株进行分子检测,检测效果没有引物AS1/RS4好。本研究是第一次从海洋污染指示生物的角度,对半知菌在海洋污染沉积物样品中的分子生物学检测状况进行了研究,为以后的进一步研究奠定了基础。