目的探讨维生素C对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响及其联合三氧化二砷（AS₂O₃）、顺铂（DDP）对肺癌A549细胞增殖、凋亡的协同作用,进一步探讨维生素C对A549细胞增殖、凋亡影响的可能机制。方法在体外培养的肺癌A549细胞株,加入不同浓度的维生素C、DDP、AS₂O₃、顺铂+维生素C、AS₂O₃+维生素C,采用细胞生长曲线及克隆形成实验检测细胞生长情况;以400 ug/ml浓度的维生素C作用于肺癌A549细胞,在其分别作用6h、12h、24h、48h后行流式细胞检测细胞周期及凋亡率并提取总RNA及蛋白,RT-PCR检测SurvivinmRNA、Caspase-3mRNA、MDR1、MRP1mRNA的表达,Western blot检测Survivin蛋白、Caspase-3蛋白的表达。结果1.生长曲线:分别以40ug/ml、400ug/ml、4mg/ml的维生素C（分别是1/10临床用药量、1倍临床用药量、10倍临床用药量）作用于肺癌A549细胞,绘制生长曲线,发现40ug/ml维生素C对A549增殖的影响不明显,而400ug/ml维生素C对A549细胞明显抑制其增殖。以临床治疗用药量即400ug/ml的维生素C分别联合0.4 ug/ml、4 ug/ml、4 0ug/ml（分别是1/10临床用药量、1倍临床用药量、10倍临床用药量）的DDP作用于A549细胞,绘制生长曲线发现400ug/ml的维生素C联合0.4 ug/ml的DDP时即已明显抑制其增殖,其抑瘤率与单用0.4 ug/ml的DDP、400ug/ml的维生素C有显著差异;与单用4 ug/ml、4 0ug/ml的DDP时无明显差异。400ug/ml的维生素C分别联合0.04ug/ml、0.4 ug/ml、4 ug/ml、4 0ug/ml（分别是1/100临床用药量、1/10临床用药量、1倍临床用药量、10倍临床用药量）的AS₂O₃作用于A549细胞,绘制生长曲线发现400ug/ml的维生素C联合0.04ug/ml的AS₂O₃时即已明显抑制其增殖,抑瘤率与单用0.04 ug/ml的AS₂O₃、400ug/ml的维生素C有显著差异;与单用4 ug/ml的AS₂O₃无明显差别。2.克隆形成实验:400ug/ml维生素C作用下的A549细胞克隆数明显减少,成瘤率明显降低。400ug/ml的维生素C联合0.4 ug/ml的DDP时抑瘤率与单用0.4 ug/ml的DDP、400ug/ml的维生素C有显著差异。400ug/ml的维生素C联合0.04ug/ml的AS₂O₃时抑瘤率与单用0.04 ug/ml的AS₂O₃、400ug/ml的维生素C有显著差异。3.流式细胞术检测:以400ug/ml维生素C作用于A549细胞分别作用6h、12h、24h、48h后使A549细胞阻滞在G0/G1、S期,并且随着作用时间的延长细胞凋亡率逐渐增加。流式细胞术检测结果表明DDP组及DDP联用维生素C组把A549细胞阻滞在G0/G1期,明显延长A549的细胞周期,DDP联用维生素C组明显协同增加细胞的凋亡。AS₂O₃组及AS₂O₃联用维生素C组把A549细胞阻滞在G0/G1期,明显延长A549的细胞周期,并且AS₂O₃联用维生素C组明显协同增加细胞的凋亡。4.RT-PCR检测:维生素C可以上调Caspase-3mRNA的表达;对SurvivinmRNA的表达未见明显影响;维生素C并未明显影响MRP1mRNA的表达,但在不影响AS₂O₃诱导细胞凋亡的基础上上调了MDR1mRNA的表达。5. Western blot检测:维生素C可以上调Caspase-3蛋白的表达;对Survivinm蛋白的表达未见明显影响结论本实验在体外证明以维生素C为基础联用AS₂O₃、DDP可以明显协同抑制肺癌A549细胞的增殖并且协同促进其凋亡,并能在保证疗效的情况下减少AS₂O₃、DDP的用药量。其协同机制可能是延长细胞周期及上调Caspase-3促进肿瘤细胞凋亡。