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目的通过采用免疫荧光共聚焦及蛋白质免疫印迹技术研究基质细胞衍生因子-1(SDF-1)的受体CXCR4在初治急性髓系白血病(AML)患者、初次化疗完全缓解AML患者以及正常人的骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)中的亚细胞器定位、细胞膜上的分布和蛋白表达量，以了解AML患者骨髓造血微环境对CXCR4在细胞内分布和表达的影响，进一步为CXCR4受体在AML的发生发展、髓外侵润、预后评估及治疗方案中的深入研究提供理论依据。方法通过体外分离提取初治AML患者、初次化疗完全缓解的AML患者、正常人的骨髓单个核细胞，分别命名为初治组、缓解组及对照组，进行BM-MSCs的原代和传代培养。采用免疫荧光共聚焦的方法观察各组P2代细胞中CXCR4受体在亚细胞器(高尔基体，内质网，内体，溶酶体)中的定位以及在细胞膜上的分布情况，然后采用蛋白质免疫印迹技术测定不同组细胞CXCR4受体的蛋白表达量的变化；全部数据使用SPSS16.0进行统计分析。结果1. BM-MSCs的体外培养：分离提取的三组单个核细胞经48h培养后，可见贴壁生长的梭形细胞，3~4d后，细胞逐渐生长并形成小的细胞克隆，约10d左右细胞克隆逐渐连成一片，呈成纤维状生长，约15d细胞生长可达90%融合。2.免疫荧光共聚焦结果：在缓解组及对照组BM-MSCs中，除在细胞表面能观察到CXCR4的红色高荧光亮度外，高尔基体特异性标志物(Giantin)的绿色荧光与CXCR4的红色荧光在细胞内高尔基体区域明显重叠，且在细胞内成少量弥漫性的分布；在初治组细胞内，未见CXCR4在细胞内的弥漫分布及与这四种细胞器标志蛋白的荧光重叠，但在细胞表面观察到了CXCR4的较强红色荧光。3.蛋白免疫印迹结果：用Western blot方法对CXCR4在初治组、缓解组及对照组的P2代细胞中的表达总量进行检测(其定量结果及变化趋势同免疫共聚焦结果)，多次重复实验后显示，初治组的CXCR4表达水平低于缓解组及对照组(P＜0.05)，而缓解组和对照组CXCR4的表达量差异无统计学意义(P＞0.05)。结论1.在初治AML患者的BM-MSCs中，CXCR4多表达在细胞表面，并不在亚细胞器及细胞质中蓄积，蛋白表达量也低于缓解组和对照组，AML患者BM-MSCs中的CXCR4的表达下调及分布改变可能与骨髓造血微环境改变有关。2.经过化疗达到缓解后，CXCR4的表达量及分布异常明显改善，表明经过化疗后骨髓造血微环境得到改善及BM-MSCs的蛋白表达功能得到纠正。3. AML患者BM-MSCs的细胞表面CXCR4的表达异常及髓外浸润的发生可能均与造血微环境的改变有关，骨髓造血微环境的这一改变影响着骨髓中基质细胞包括BM-MSCs在内的相关细胞因子及受体蛋白的表达，这有助于进一步认识白血病的发病及髓外浸润机制，并为白血病的诊断和治疗诊疗提供新的思路。