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阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)的预防和治疗是目前研究的一大难点。其发病机制复杂,现阶段的研究主要以改善患者记忆力障碍为目的,从自由基损伤、胆碱能损伤、Aβ神经毒性、tau蛋白磷酸化、神经炎症等方面展开。研究表明,酚类化合物能够对AD的多种发病机制进行干预。香水莲花(Nymphaeahybrid)为睡莲科睡莲属水生宿根草本植物,具有多种生物学活性,并且其功效与富含酚类化合物密切相关。本文以蓝色香水莲花为原料,以乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)活性抑制率为指标,制备得到对AChE活性具有良好抑制作用的香水莲花提取物(Nymphaea hybrid extract,NHE),并通过东莨菪碱诱导的记忆障碍小鼠探究其对小鼠学习记忆能力的影响以及可能的作用机制。本文研究结果如下:(1)通过体外AChE抑制实验研究发现,NHE对AChE的抑制作用呈剂量效应,IC50值为239.34±4.24μg/mL,抑制类型为混合型可逆抑制。采用分级萃取方式对NHE进行的初步纯化具有一定效果,酚类化合物在乙酸乙酯相中得到富集,并且乙酸乙酯相的IC50值为184.62±2.52μg/mL,其作用效果优于NHE。同时,Pearson相关性分析发现,NHE及其分级相的AChE活性抑制率与总酚含量、总黄酮含量呈极显著相关(r>0.8)。(2)采用UPLC-TripleTOF-MS/MS技术,首次对NHE中酚类化合物进行全面定性分析,在NHE中共鉴定出22种酚类化合物,包括7种酚酸类化合物和15种黄酮类化合物。对NHE中确定的8种酚类化合物进行定量分析,结果显示,它们在NHE中的含量均较低,其中柯里拉京含量最高为2.63%。而NHE和乙酸乙酯相对AChE的抑制作用是多种化合物共同作用的结果,其中,没食子酸、槲皮素、鞣花酸、杨梅素和槲皮苷对AChE活性的IC50值都低于NHE和乙酸乙酯相,推测它们是发挥作用的重要化合物。(3)采用东莨菪碱诱导的记忆障碍小鼠模型,Morris水迷宫实验结果显示,NHE可以逆转东莨菪碱对小鼠造成的学习记忆缺陷,并且呈现剂量效应,具体表现在:逃避潜伏期显著缩短(p<0.01),穿越平台次数和目标象限停留时间百分比显著增加(p<0.05),小鼠的游泳模式得到改善。同时,小鼠脑组织病理学结果显示,NHE能改善东莨菪碱引起的小鼠脑组织的异常变化,增加神经元细胞数量,减少固化萎缩状态细胞数量,使得细胞排列趋于紧密。(4)Elisa试剂盒和Western blot技术检测结果显示,NHE的干预能逆转东莨菪碱引起的脑部氧化应激,能降低丙二醛(MDA)含量(P<0.01),提高超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力(P<0.01);NHE的干预能恢复东莨菪碱造成的胆碱能损伤,增加小鼠脑组织海马和皮质中乙酰胆碱(ACh)含量(P<0.01),降低AChE活性(P<0.01);NHE的干预能减轻东莨菪碱造成的突触可塑性损伤,增加大脑海马和皮质中细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)和环磷腺苷反应元件结合蛋白(CREB)的磷酸化水平(P<0.01),同时增加脑源性神经营养因子(BDNF)的表达(P<0.01)。综上,体外抑制AChE活性实验和体内东莨菪碱诱导的记忆力障碍AD小鼠模型的结果表明,NHE具备预防AD的潜力,具体机制涉及:改善脑部氧化应激、平衡胆碱能系统、激活ERK-CREB-BDNF信号通路,并且其作用与酚类化合物密切相关,可能是多种酚类化合物共同作用的结果。本文为香水莲花提取物改善记忆力、预防阿尔兹海默症等方面产品的开发利用提供一定的理论依据。