目的研究降脂颗粒治疗高脂饮食诱导的NAFLD大鼠的效应及其基于Irisin信号通路的作用机制与靶点。方法1.雄性Wistar大鼠24只,随机分为对照组(Control)、模型组(Model)与降脂颗粒组(JZKL)。对照组给予普通饲料,模型组与降脂颗粒组喂养高脂饲料。造模时间为8周,从第5周开始降脂颗粒组灌胃给药。检测各组大鼠体重、肝重、肝组织HE染色、油红O染色与肝脏TG含量;检测大鼠血清转氨酶、血脂;检测大鼠肝组织中Irisin,AMPKα,ACC,HMGCR m RNA与蛋白的表达,以及AMPKα,ACC蛋白磷酸化的情况。2.采用地塞米松,异丁基甲基黄嘌呤,胰岛素混合的诱导剂诱导小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞。观察重组蛋白Irisin对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的影响,检测细胞中棕色脂肪标志因子CD137,TMEM26,PRDM16、线粒体因子UCP1,Otop1、脂肪生成相关因子AMPKα,ACC,LXRα,SREBP-1c,PPARγ,FAS以及脂肪氧化相关因子PPARα,CPT1A的m RNA与蛋白的表达。3.应用游离脂肪酸诱导人肝癌细胞株Hep G2制备肝细胞脂肪变模型。应用重组蛋白Irisin与AMPKα的抑制剂Compound C同时干预脂肪变的Hep G2细胞,研究Irisin在脂肪变肝细胞中的作用靶点。检测细胞中AMPKα,ACC,HMGCR m RNA与蛋白的表达以及AMPKα,ACC蛋白磷酸化的情况。结果1.高脂饮食成功制备了NAFLD大鼠模型,大鼠肝脏HE染色及油红O染色显示,NAFLD大鼠肝脏中出现了大量的脂肪沉积,肝脏中TG含量升高;NAFLD大鼠血清ALT,AST,γ-GT,TC,LDL-c的水平显著升高;降脂颗粒可显著改善NAFLD大鼠肝脏中脂肪沉积及血清肝功能、血脂等,其作用机制可能是通过调节NAFLD大鼠肝脏中Irisin的表达,进而调控NAFLD大鼠肝脏中脂肪与胆固醇的生成2.Irisin可抑制3T3-L1前脂肪细胞成脂分化,上调白色脂肪棕色化相关因子CD137,TMEM26,PRDM16 m RNA与线粒体基因Otop1 m RAN以及UCP1蛋白的表达;下调脂肪细胞中脂肪生成相关因子LXRα,SREBP1c,ACC,PPARγm RNA及PPARγ蛋白的表达,促进了AMPKα与ACC蛋白的磷酸化;上调脂肪氧化相关因子PPARα,CPT1 m RNA与蛋白的表达。3.Irisin可通过调节ACC与HMGCR m RNA与蛋白的表达降低脂肪变性的Hep G2细胞中脂肪与胆固醇的生成,这一作用是通过AMPKα介导的。当脂肪变性的Hep G2细胞中同时加入Irisin与AMPKα抑制剂Compound C时,Irisin对于ACC与HMGCR调节作用消失。结论1.Irisin可促进脂肪细胞转化为棕色脂肪细胞、降低脂肪细胞中脂肪生成并增加脂肪氧化,调节脂肪细胞能量代谢。2.Irisin可通过调节AMPKα降低脂肪变性的肝细胞中脂肪与胆固醇的生成,其机制是通过Irisin-AMPKα-ACC与Irisin-AMPKα-HMGCR信号通路实现。3.降脂颗粒可通过上调NAFLD大鼠肝脏中Irisin的表达,并通过调节IrisinAMPKα-ACC与Irisin-AMPKα-HMGCR信号通路改善NAFLD大鼠肝脏中脂质沉积。