洋葱有效成分的提取及生物活性研究

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洋葱是传统的药食两用植物,营养成分丰富,含有类黄酮、挥发油类、多糖类、苯丙素类、甾体皂苷类、前列腺素类和含氮化合物等有效成分,它具有抗氧化、抗肿瘤、降血糖血脂、抑菌等生理作用。但对洋葱蛋白及多肽的抗氧化作用报道少见,对洋葱黄酮、挥发油、蛋白和多肽生物活性对比的研究报道尚不多见。本文利用单因素和正交试验优化研究了洋葱黄酮浸膏、挥发油的提取工艺;以Vc为阳性对照,采用普鲁士蓝法、邻菲罗啉-Fe2+氧化法、邻苯三酚自氧化法、DPPH法研究洋葱黄酮、挥发油、蛋白和多肽的抗氧化活性;利用MTT法研究洋葱黄酮与挥发油对B16F10、SiHa、A549和MDA-MB-231细胞的体外抑制作用。在此基础上,以洋葱黄酮浸膏为原料,通过正交试验确定片剂处方,利用湿法制粒压片法制备了洋葱黄酮口服片。具体结果如下:(1)从新鲜洋葱中提取黄酮浸膏的最佳条件为:体积分数70%的乙醇,料液比1:20,在60℃下回流提取120 min,验证得平均提取率为1.6993%。通过黄酮类化合物的验证反应确定了提取物含黄酮;最后以芦丁为标准对照品,测定制备的浸膏粉中黄酮的含量为89.3%。(2)从新鲜洋葱中提取挥发油的最佳工艺条件为:料液比1:1.5,35℃下浸泡150min后,利用挥发油提取器提取90 min,加入乙醚至刻度,放出混合液挥干乙醚,得浅黄色具有强烈刺激性气味的油状液体,提取率为0.389%。(3)洋葱的四种提取物均具有一定体外抗氧化能力。其中,总还原能力、·OH清除能力和O2-·清除能力大小顺序为:洋葱黄酮>洋葱多肽>洋葱蛋白>洋葱挥发油;而DPPH·清除能力大小顺序:洋葱多肽>洋葱黄酮>洋葱蛋白>洋葱挥发油。实验提示我们,洋葱黄酮能更好的清除·OH、O2-·自由基,总还原力也最大,而洋葱多肽对DPPH·的清除效果最优。综合来看,洋葱黄酮的抗氧化能力强,洋葱挥发油最弱。(4)洋葱的四种提取物对B16F10、SiHa、A549和MDA-MB-231肿瘤细胞的抑制效果不同。其中洋葱多肽和蛋白对上述细胞几乎没有抑制作用;洋葱黄酮及挥发油的对上述细胞增殖具有明显的抑制作用,且呈现作用时间和剂量的依赖性。洋葱黄酮对B16F10、MDA-MB-231的抑制作用强于挥发油。(5)口服洋葱片剂的最佳处方为:微晶纤维素80%,PVPP 3%,PVP K30 3%,硬脂酸镁0.5%,甘露醇2%,与洋葱黄酮浸膏混匀,通过湿法制粒压片、薄膜包衣,制备的洋葱口服片质量符合《中国药典》(2015年版)要求,其中黄酮含量为13.02mg/片。
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