柯萨奇病毒B3（Coxsackievirus B3,CVB3）属于微小RNA病毒科（Picornaviridae）肠道病毒属（Enterovirus）,是引发多种疾病的病原体,如病毒性心肌炎（viral myocarditis）、无菌性脑膜炎（aseptic meningitis）及胰腺炎（pancreatitis）等。被CVB3感染的组织中会出现细胞坏死性破裂,这也是引起病理性炎症的主要原因。早期病毒学研究认为CVB3感染通过激活宿主细胞内的caspase 8/9及其下游caspase 3引发细胞凋亡,而细胞凋亡并不会引发炎症,这一矛盾一直缺乏完善的解释,不利于CVB3感染致病机制的研究。近年来的细胞生物学研究发现细胞焦亡（pyroptosis）是一种可造成细胞破裂并引发炎症的细胞死亡形式,而活化的caspase3可通过切割gasdermin E（GSDME）引发细胞焦亡。所以我们推测CVB3感染可通过激活caspase 3和GSDME引发细胞焦亡,这一假说可以合理地解释CVB3导致炎症的分子机制。为了验证这一假说,选用GSDME本底表达较高的He La细胞系作为病毒感染模型,用CVB3感染He La细胞后,通过形态观察、碘化丙啶（propidium iodide,PI）染色及胞外乳酸盐脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）测定证实细胞发生了焦亡,并通过Western blot观察到caspase 3和GSDME的激活;然后,利用特异性si RNA敲低细胞内GSDME表达水平并用CVB3感染,发现细胞焦亡被显著抑制,证明GSDME确为CVB3引发焦亡所必需。为确认激活GSDME上游的信号通路,我们用广谱性caspase（pan-caspase）抑制剂z-VAD-FMK抑制caspase家族蛋白活性,发现CVB3引起的GSDME激活和细胞焦亡被显著抑制,证明caspase家族蛋白参与了CVB3激活GSDME的上游过程;为进一步明确参与的caspase蛋白家族成员,caspase 3、8和9的特异性抑制剂处理细胞后,发现只有抑制caspase 3或同时抑制caspase 8/9才能减弱CVB3引起的GSDME激活和细胞焦亡。因为caspase 8和9是caspase 3的上游信号,所以上述结果证明CVB3感染可同时激活caspase 8和9,而两者共同激活caspase 3,从而引发细胞焦亡。综上所述,本课题揭示了CVB3通过caspase 3/GSDME途径引发细胞焦亡的分子机制。该研究成果为CVB3引发炎症的机理提供了可能的合理解释,为CVB3相关炎症的治疗提供了线索。