肿瘤细胞功能异质性与侵袭和转移能力相关性的研究

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mzhou2009
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恶性肿瘤最主要的特征就是侵袭和转移。癌细胞侵袭和转移的机理至今尚未完全明了。为什么肿瘤细胞会发生侵袭和转移,具有百分之百转移率的高转移群体中只有极少细胞能形成转移灶? 粘附、运动和水解是瘤细胞侵袭过程每一步骤均涉及到的的三大要素。为此,我们建立了体外多功能综合检测方法和各种功能表型突出的细胞系DCS,并进行了观察研究。探讨在体外寻找有转移潜能的癌细胞的可能性。 小鼠树突状细胞肉瘤细胞系(DCS)的建立及鉴定 我们取冻存的615小鼠体内传代LⅡ组织悬液接种615鼠腋下。第二次传代后取脾剪碎,皮下接种成瘤后,进行原代培养。55天开始传第一代,每三天传代一次,已传至25代并冻存。命名为DCS(dendritic cell sarcoma)细胞系。 通过形态学、酶组织化学、免疫组织化学及细胞功能的比较研究,我们认为DCS细胞最大可能来源于脾指状树突状细胞。树突状细胞常与单核吞噬细胞系统伴随,不易区别。DC细胞在肿瘤疫苗制备中的作用极受重视。另一方面,DC具有活跃的运动能力,可以从组织主动进入淋巴管和血管,到达相应的淋巴结和脾脏执行其抗原呈递功能。这一过程与癌细胞侵袭转移有相似之处。 癌细胞粘附(Adhesion)、运动(Locomotion)和水解(Lysis)多功能综合测定方法(ALL assay)的建立 将直径300-400nm左右的金颗粒作为运动轨迹指示剂,铺在水解指示剂FN或小鼠血浆制备成的基质蛋白膜上,加入DCS细胞,小鼠肺腺癌细胞LA795,小鼠前胃癌细胞MFC。六孔板内培养24小时。实验完成后,PBS洗涤,2.5%戊二醛固定,考马氏亮兰R-250染色。金颗粒直径300-400nm,光镜下呈均匀分布的黑色颗粒。细胞运动后,大部分金颗粒被清除。
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