亚健康是指人体处于健康和疾病之间的一种状态。处于亚健康状态者,不能达到健康的标准,表现为一定时间内的活力降低、功能和适应能力减退的症状,但不符合现代医学有关疾病的临床或亚临床诊断标准。在亚健康的人群中普遍存在慢性疲劳与活力减退现象,慢性疲劳是亚健康状态最典型、最重要的表现之一。在我国,40岁以上的白领阶层中慢性疲劳的情况比较突出,其中75%属于亚健康人群,40%主诉为慢性疲劳。因此,寻找有效防治亚健康的措施已成为医学界所面临的一个急需解决的重大课题。但亚健康这种症状上的多样性和诊断上的困难性造成了现代医学目前对其防治尚无较好的措施。然而鉴于中医学本身的特点,决定了祖国医学防治亚健康慢性疲劳具有明显优势。对疲劳的认识,早在《黄帝内经》中就有了相关的论述。目前,对疲劳的中医药治疗也已有诸多研究,这些都为中医药治疗亚健康疲劳提出了一定的理论和实验依据。随着人们对中医药在治疗疲劳方面疗效的认识,其应用将更加广泛。然而,尽管中医药对其防治有明显的疗效,但面对庞大的亚健康疲劳人群,又因亚健康的知晓率不高以及中药汤剂服用的不便,从而限制了中医药防治亚健康疲劳优势的发挥。因此,有必要寻找一种简便有效的中医药方法防治亚健康疲劳。在多年的研究基础上,我们发现广东凉茶为防治亚健康开辟了新的途径和方法。因此在中医辨病辨证基础上,结合亚健康疲劳的临床特点和广东地区的地域特色,我们研制出加减二至丸凉茶。本实验主要分两部分:第一部分参照《亚健康中医临床指南》制定的亚健康概念及表现,结合大学生特点自行拟定亚健康调查问卷,对广东某医科大学5800名学生进行亚健康疲劳调查分析;第二部分:对加减二至丸凉茶进行药学和药效两方面的实验研究:①以总黄酮含量为指标,考察ZTC 1+1Ⅱ型天然澄清剂用于加减二至丸凉茶的澄清效果;②按卫生部发布的《保健食品功能学评价程序和检验方法规范》中规定,以负重游泳时间、血清尿素测定、肝糖原等为指标,评价加减二至丸凉茶的抗疲劳效果。第一章研究背景目的了解亚健康状态、疲劳以及亚健康疲劳的研究现状。方法以中国期刊全文数据库、中国生物医学文献库为媒介,搜索在篇名中包含“亚健康”、“疲劳”、“亚健康疲劳”的学术期刊全文,对其进行文献回顾分析。结果①国内学者对亚健康做了大量的研究和探讨,目前对亚健康的定义和判断标准基本参照2006年10月中华中医药学会发布的《亚健康中医临床指南》。②近5年文献报道中亚健康的现患率差别很大,多在20%～90%之间。由于目前亚健康研究仅限于横断面研究和病例对照研究,所以仅能得到亚健康的现患率,而不能得到发生率。因此亚健康的发生率至今还是未知的。③亚健康状态临床表现多样,但全国各地的研究表明,疲劳出现频率居亚健康临床表现的首位。④疲劳的产生机理主要涉及能量物质、代谢产物和机体内环境改变等方面变化,这给我们研究有关亚健康疲劳的干预奠定了基础。⑤中医早在《黄帝内经》中就有了对疲劳的相关描写。目前对疲劳的治疗也已有诸多研究,这些都为中医药治疗亚健康疲劳提出了一定的理论和实验依据。⑥目前对亚健康疲劳的概念、发生机制及干预等方面的研究尚缺乏完整系统的结论。结论亚健康已成为当今危害人类健康的头号隐形杀手,疲劳是亚健康状态最常见的表现,因此有效干预亚健康疲劳势在必行。第二章亚健康疲劳的临床流行病学调查研究目的探讨医学本科生亚健康疲劳现状及相关因素。方法采用自制亚健康调查表对广东某医科大学5800名学生进行亚健康疲劳调查分析。亚健康疲劳诊断参照《亚健康中医临床指南》,相关因素采用Logistic回归分析。结果①共发出问卷5800份,收回5729份,回收率98.78%,其中合格问卷5599份,合格率97.73%。在5599份合格问卷中根据医学体检报告将疾病状态101名(1.8%)剔除。剩余5498份问卷纳入结果分析。②亚健康疲劳现患率68.94%,女生现患率高于男生(P=0.046)。③亚健康疲劳相关症状有:经常打呵欠、没有精力应付日常生活、容易感冒等。④主要相关因素为缺乏安全感、不注意饮食卫生、缺乏休闲活动、对卫生保健服务不满意、熬夜和锻炼情况。结论医学本科生亚健康疲劳的现患率比较高,相关因素复杂,需要从多方面对学生进行健康教育及有效的干预防治措施。第三章加减二至丸凉茶抗疲劳的实验研究实验一目的:考察ZTC 1+1Ⅱ型天然澄清剂用于加减二至丸凉茶的澄清效果。方法:①采用紫外分光光度法,以总黄酮含量为指标,考察澄清剂用量(与中药提取液的百分比)、提取液浓度、反应时间3个影响因素对澄清效果的影响。②将加减二至丸凉茶处方药材,加入10倍量水,煎煮2次,每次2小时,合并滤液,浓缩至1∶20(原药:提取液)。水提醇沉法采用95%乙醇加入提取液,将提取液乙醇浓度调至90%,静置24小时后,过滤。ZTC1+1Ⅱ型天然澄清剂法:按产品要求配制A、B组分,将6%提取液体积的B组分溶液缓慢细流加入提取液中,搅匀,再将8%提取液体积的A组分缓慢细流加入提取液中,搅匀,置60℃水浴中保温1h,静置30min后,2000 r/min离心10min,取上清液。取上述两种方法制备的溶液测定总黄酮和稳定性考察。结果:加减二至丸凉茶水提液的最佳澄清条件为:澄清剂用量:A组分8%,B组分6%,中药提取液浓度为1∶20,温度为60℃时反应60分钟。结论:ZTC 1+1Ⅱ型天然澄清剂沉淀工艺能有效除去中药材水提取液中的杂质,并能提高总黄酮含量(P=0.000);同时保证溶液质量稳定性(P=0.000)。ZTC1+1Ⅱ型天然澄清剂应用于加减二至丸凉茶,既能保证其有效成分,又能达到澄清效果。实验二目的通过动物实验研究加减二至丸凉茶的抗疲劳作用。方法雄性昆明种小鼠160只,每项功能测试指标用实验动物40只,按体重分层随机法分为阴性对照组和加减二至丸凉茶低、中、高3个剂量组,各受试样品组经口灌胃,连续30天。按卫生部发布的《保健食品功能学评价程序和检验方法规范》中“缓解体力疲劳作用检验方法”中负重游泳试验、血清尿素测定、肝糖原测定和血乳酸测定的规定方法进行实验。结果加减二至丸凉茶中、高剂量组较对照组负重游泳时间明显延长,高剂量组可减少运动小鼠尿素氮的产生,并可增加运动小鼠肝糖原的储备;高剂量组血乳酸曲线下面积均值与对照组比较差异有显著性(P＜0.05),说明高剂量时具有降低运动小鼠血乳酸的作用。结论通过实验说明了加减二至丸凉茶具有抗疲劳的作用,为本凉茶的开发利用提供了理论依据和实验支持,但其缓解疲劳的作用机制还有待进一步研究。