针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织p-ES、Caspase-9表达的影响

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目的:通过观察针刺大椎、百会、人中穴对脑缺血再灌注损伤后大鼠海马内皮抑素(Endostatin,ES)磷酸化及Caspase-9蛋白的表达,探讨针刺对脑缺血再灌注后损伤的脑保护作用及其可能机制。方法:参照Zea Longa线栓法制备大脑中动脉缺血模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO),将120只雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组、药物组、针刺穴位组,30只/组。造模成功后,假手术组、模型组仅捆绑,药物组以3mg/Kg(稀释至1ml)腹腔注射,针刺穴位组行大椎、人中、百会穴针刺,12h/次,第一次治疗前及第6次治疗完成后行神经功能缺损评分,TTC染色观察大鼠缺血侧脑梗死面积,Western Blot法检测内皮抑素蛋白磷酸化(Endostatin phosphorylation,p-ES)表达;免疫组化法检测Caspase-9表达。结果:1神经功能缺损评分对比:组间比较,治疗前组间比较,与假手术组比较,模型组、药物组及针刺穴位组差异具有统计学意义(P<0.01);造模3组间差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后组内比较,模型组、药物组及针刺穴位组差异有统计学意义(P<0.01)。2脑梗死面积比值比较:治疗后与假手术组比较,模型组、针刺穴位组、药物组大鼠脑梗死面积比增加,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,针刺穴位组差异有统计学意义(P<0.01)。3 ES比较:治疗后,与假手术组比较,模型组、药物组及针刺穴位组差异有统计学意义(P<0.01),与模型组比较,药物组及针刺穴位组差异有统计学意义(P<0.05)。4 Caspase-9比较:治疗后与假手术组比较,模型组、药物组、针刺穴位组差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,药物组与针刺穴位组差异有统计学意义(P<0.01);与药物组比较,针刺穴位组差异有统计学意义(P<0.01)。结论:1.针刺能降低脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能缺损评分及脑梗死面积比值,实现脑保护作用。2.针刺能降低脑缺血再灌注损伤风险,其效应机制可能与通过下调ES表达、促进血管新生有关。3.针刺能下调脑缺血侧Caspase-9的表达,减少脑缺血再灌注损伤,可能与针刺能降低细胞凋亡因子的产生有关。4.ES的表达与Caspase-9的表达成正相关,针刺抗缺血再灌注损伤机制可能与ES调控Caspase-9的表达,从而抑制细胞凋亡有关。
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