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研究目的:探讨冬凌草甲素(Oridonin,Ori)对胶原酶诱导的大鼠脑出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)模型ICH后继发性脑损伤的神经保护作用及可能的作用机制。研究方法:采用右侧基底节区注射胶原酶的方法诱导大鼠脑出血模型,实验大鼠随机分为假手术(SHAM)组、脑出血(ICH)组、溶剂(ICH+Veh)组、5mg/kg Ori低剂量(ICH+Ori(L))组、15mg/kg Ori中剂量(ICH+Ori(M))组、25mg/kg Ori高剂量(ICH+Ori(H))组及Nrf2抑制剂ML385(ICH+Ori+ML385)组。所有实验大鼠在手术或药物处理后72小时进行神经行为学检测,之后处死全部实验大鼠,提取脑组织,其中需要进行染色实验的脑组织,大鼠处死前使用4%多聚甲醛进行脑组织灌注。将脑组织分为小脑、左半脑及右半脑三个部分,然后使用干湿重法测量各部分脑组织含水量。用FJC染色检测各组大鼠脑内神经元损伤状况,用Western blot检测Nrf2/HO-1抗氧化蛋白、ABI3和NF-κB炎症蛋白的表达,使用免疫荧光染色检测Nrf2、HO-1在实验大鼠脑内的表达情况,用酶联免疫吸附(ELISA)测定各组脑组织促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6等的表达。结果:神经行为学结果显示Ori治疗组各组改良神经功能缺损程度评分(mNSS)均低于模型组,且在Ori中剂量和高剂量组时差异有显著性(P<0.05)。脑组织含水量检测结果显示小脑与左半脑组织含水量在各组间无差异,而右侧脑组织在ICH造模后含水量较SHAM组显著增加(P<0.05),但在经过中、高剂量Ori处理后,右侧脑组织含水量明显低于ICH组(P<0.05)。随后进行Western blot检测显示,ABI3在ICH后6h、12h、24h及48h表达逐渐升高,在72h表达出现下降,但是相对于SHAM组仍升高,差异有显著性。此外,ICH组Nrf2、HO-1、ABI3及NF-κB的蛋白表达均较SHAM组升高,在中、高剂量Ori干预后,Nrf2、HO-1的蛋白表达显著上升,ABI3、NF-κB的表达显著下降。此外,这些实验结果都显示了以上指标在Ori中剂量组和Ori高剂量组之间没有明显差异,因此,我们以中剂量(15mg/kg)作为Ori干预的最适剂量,以进行后续实验。免疫荧光染色结果显示,与ICH组相比,Ori治疗组的大鼠脑内Nrf2/HO-1的表达显著升高。ELISA检测结果显示ICH后脑内炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6显著升高,但是Ori干预可以显著减少这些促炎性细胞因子的表达(P<0.05)。FJC染色结果显示Ori组变性神经元数目较ICH组减少,但在使用Nrf2抑制剂后变性神经元数目增多,差异具有显著性(P<0.05)。结论:1.Ori可减轻大鼠ICH后的神经元损伤和脑组织水肿程度,同时促进神经功能的恢复,对ICH大鼠模型有神经保护作用。2.Ori可能是通过促进Nrf2/HO-1抗氧化信号通路实现在ICH中的神经保护作用。3.Ori通过减少促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6的表达来减轻ICH后炎症损伤,这可能与NF-κB炎症通路的抑制有关,同时ABI3蛋白可能参与Ori抗炎过程。