【摘 要】
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全文分三部分.第一部分,maspin基因表达和定位研究.我们发现maspin在基因筛选的16/21对大肠癌配对标本存在高表达现象;在该所建立的实体瘤减数杂交库中maspin在胃癌,及贲门癌
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全文分三部分.第一部分,maspin基因表达和定位研究.我们发现maspin在基因筛选的16/21对大肠癌配对标本存在高表达现象;在该所建立的实体瘤减数杂交库中maspin在胃癌,及贲门癌和大肠癌4对配对标本中亦表达增高.为验证maspin在大肠癌中是否存在高表达的现象,找到maspin在大肠癌中的表达规律,因此我们采用NorthernBlot,RT-PCR,原位杂交的方法在大肠癌细胞系,大肠癌组织,大肠癌外周血中检测maspin的表达情况.第二部分,maspin研究的工具质粒构建.为研究maspin的基因表达和定位,转移相关功能,我们在美国国立卫生院生物技术信息中心(nationalcenterforbiotechnologyinformation,nationalinstituteofhealthNIH)的genebank数据库中取得maspin的基因序列,将其克隆到工具质粒中,为下一步研究做前期工作.第三部分,maspin的转移相关功能的研究.maspin作为可能的大肠癌转移相关基因,其基因表达变化应该和大肠癌转移各个阶段的粘附和运动的变化总体来说有一致性.因此我们通过Northen杂交寻找maspin表达增高的大肠癌细胞系,转入反义maspin基因片段从而阻断maspin表达,通过与其maspin表达增高的对照组大肠细胞系来比较,根据大肠癌侵袭和转移的不同阶段设计一系列实验来研究maspin的功能.
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