螺虫乙酯(Spirotetramat)是一种能有效防治蚜虫、蓟马、粉虱等刺吸式口器害虫的杀虫剂。目前,国内外关于螺虫乙酯的研究,主要集中在合成工艺、药效、在植物体内的消解残留及在环境中的迁移转化方面。有研究发现螺虫乙酯对害虫的田间药效已有所下降,昆虫害虫会发生代谢或其他原因导致对螺虫乙酯产生抗药性,目前尚无螺虫乙酯在昆虫及哺乳动物体内的代谢研究以报道。为了研究螺虫乙酯在家蚕体内的代谢规律,本论文以螺虫乙酯为研究对象,以家蚕为材料,建立了螺虫乙酯及4种代谢物在家蚕主要组织部位中的残留分析方法;研究了螺虫乙酯对家蚕的毒性及其在家蚕中肠、丝腺、脂肪、血液、粪便中螺虫乙酯及代谢物的分布;分析了螺虫乙酯对家蚕3大解毒酶系的活性变化影响;通过qRT-PCR技术分析了螺虫乙酯对家蚕解毒酶相关基因表达的影响。主要研究结果如下:(1)采用QuEChERS样品前处理方法,结合液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测技术,以负离子扫描和多反应检测模式(MRM),建立了家蚕中肠、丝腺、脂肪中螺虫乙酯及代谢物的残留分析方法。结果表明,以甲醇为提取溶剂,经C18净化,螺虫乙酯及代谢物的添加回收率为80.2-108.7%,满足农药残留检测要求,适合家蚕各组织部位样品中残留螺虫乙酯及代谢物的多残留检测。(2)分析了各组织部位中螺虫乙酯及2种代谢物的分布及随时间的变化情况。结果表明,B-enol及B-keto能在家蚕所有组织中检测到;B-glu仅在中肠及粪便中被检测到;B-mono无法检测到。从变化趋势看,螺虫乙酯能在中肠中降解为B-enol、B-keto及B-glu,且B-glu能通过粪便快速排出体外。经过血液的流动,螺虫乙酯及B-enol能在丝腺中积累,含量升高,且不易被降解转移,而在脂肪中,B-enol含量不断增高,说明螺虫乙酯在脂肪内被有效降解为B-enol,B-keto在中肠、丝腺、脂肪中都呈下降趋势,说明螺虫乙酯被快速降解为B-keto,随后B-keto慢慢被转移并排出。(3)螺虫乙酯暴露后,测定家蚕各组织部位(中肠、血液、丝腺和脂肪)3种解毒酶的活性变化。研究发现,在中肠中,处理组3种酶活性均高于对照组,中肠是家蚕的主要消化器官,螺虫乙酯在中肠中能被快速代谢,并被快速排出体外,说明中肠可能是代谢螺虫乙酯的主要场所,且3种酶均有参与螺虫乙酯的代谢。在丝腺中,仅GST活性有所上升,螺虫乙酯能够在丝腺中少量代谢,但大量的螺虫乙酯及代谢物在丝腺中积累。在脂肪中,P450活性较高,为对照组的1.87-2.44倍,螺虫乙酯在脂肪中大多能被代谢,但B-enol持续升高,说明P450可能参与螺虫乙酯的代谢,但脂肪不能将B-enol代谢并排出体外。在血液中,仅GST活性上升,说明血液对有毒物质较小的代谢作用可能与GST有关。(4)以解毒酶 7 个相关基因CYP9a19 CYP9a22、CYP6AB4、GST01、GSTe2、Bm CarE-11和BmCarE8-V1为研究对象,研究螺虫乙酯处理后家蚕解毒基因的表达情况。结果表明在中肠中,P450 3种基因的上调说明P450参与了家蚕对螺虫乙酯的代谢过程。GST相关基因上调水平较低,最高上调了 1.7-1.8倍。说明GST不是中肠主要的解毒酶。相比中肠中7种基因较高的表达量,脂肪中基因表达量较低,且随时间无显著变化趋势,这可能是由于螺虫乙酯对于脂肪合成的抑制作用,影响了解毒酶基因的表达,从而调控解毒酶活性。通过螺虫乙酯在家蚕体内的代谢研究,以明确其在家蚕体内的代谢产物;了解家蚕的主要代谢途径;阐明解毒酶的作用及相关基因的调控作用。因此,此研究为螺虫乙酯的合理使用和安全性评价提供了理论依据。