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背景：世界卫生组织其属下的国际癌症研究机构统计的2012年全球女性最主要致死癌症中，宫颈癌位于第三。而中国宫颈癌的发病率在女性恶性肿瘤中居首位，已经成为严重影响女性健康的恶性疾病。目前宫颈癌的治疗方法主要是手术、化疗和放疗，但是患者的生存率和预后并不理想。近几年来，随着宫颈癌的发病越来越趋向于年轻化，研究宫颈癌发生及发展过程中的分子机制和开发新的诊断治疗方法尤显重要。蛋白质的糖基化是在高尔基体和内质网内按照特定的顺序由糖基转移酶和糖苷酶协同完成。大多数肿瘤细胞的蛋白质都存在异常的糖基化修饰，而这些修饰主要是由定位于高尔基体中的糖基转移酶来催化完成。ST3Gal-IV能特异地催化带有负电荷的唾液酸，以α-2,3糖苷键的形式转移到糖蛋白的末端半乳糖上。已有文献报道，ST3Gal-IV可能参与调控糖蛋白的循环半衰期，选择素配体的形成和癌症转移。然而，ST3Gal-IV在宫颈癌的发生发展中所起的作用还不十分清楚。 目的：1.构建pcDNA3.1/ST3Gal-IV表达载体；2.筛选获得ST3Gal-IV稳定上调的人宫颈癌单克隆细胞株；3.考察ST3Gal-IV上调对宫颈癌细胞生长增殖和转化能力的影响；4.初步探讨ST3Gal-IV调控宫颈癌细胞生长增殖的分子机制。 方法：1.使用分子克隆技术构建ST3Gal-IV过表达载体；2.利用脂质体法转染重组质粒到HeLa细胞，通过G418和有限稀释法筛选获得ST3Gal-IV稳定上调的宫颈癌单克隆细胞株，采用RT-PCR、Western blot和Lectin方法检测单克隆细胞株中ST3Gal-IV的表达；3. CCK-8法检测ST3Gal-IV上调对宫颈癌细胞生长增殖能力的影响；4.平板克隆形成实验检测ST3Gal-IV上调对宫颈癌细胞转化能力的影响；5. Western blot分析ST3Gal-IV上调对宫颈癌细胞周期相关蛋白表达的影响。 结果：1. PCR法和EcoR I/Hind III双酶切鉴定证明得到阳性克隆，且测序正确；2.筛选得到的单克隆细胞（C1和C2）中ST3Gal-IV的mRNA，蛋白和糖链水平显著降低；3.过表达ST3Gal-IV的细胞在72h和96h时细胞增殖能力显著降低；4.单克隆细胞株C1和C2的细胞集落形成率显著降低；5.与HeLa组和NC组相比，单克隆细胞株C1和C2中Cyclin D1，Cyclin E1，CDK2和CDK4蛋白表达均显著降低，p21蛋白表达显著增加，而p53蛋白的表达无显著性差异。 结论：1.成功构建pcDNA3.1/ST3Gal-IV表达载体；2.获得ST3Gal-IV表达稳定上调的人宫颈癌HeLa单克隆细胞株及阴性对照NC单克隆细胞株；3.过表达ST3Gal-IV可抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖及克隆形成能力。4. ST3Gal-IV上调通过促进p21蛋白的表达和抑制Cyclin D1，CDK4，Cyclin E1和CDK2蛋白的表达而引起HeLa细胞发生S期阻滞。