紫花地丁含药血清对巨噬细胞炎症因子分泌的影响

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目的:探讨紫花地丁用于炎症性疾病的疗效机制。方法:采用紫花地丁水煎剂灌胃干预清洁级SD大鼠常规制备含药血清,按一定浓度于96孔板中与小鼠腹腔巨噬细胞共同培养24小时后,以Griess比色法检测培养上清中NO含量,以中性红法检测巨噬细胞吞噬活性,以ELISA法检测培养上清中TNF-α、IL-6含量,以rt-PCR法检测TLR-1、TLR-2、TLR-3、TLR-4、 TLR-5mRNA的表达。结果:与相同浓度的正常血清对照组比较,在5%-20%的紫花地丁含药血清作用下:(1)未经LPS活化的巨噬细胞TNF-α、NO分泌增加(P<0.05或P<0.01),iNOS表达量显著升高(20%含药血清组)(P<0.01),而IL-6分泌则降低(5%含药血清组)(P<0.01)或增加(10%含药血清组)(P<0.01);巨噬细胞中性红吞噬量明显升高(P<0.01);紫花地丁含药血清一定浓度组巨噬细胞TLR-1、TLR-2和TLR-3mRNA表达量表现出升高或降低(P<0.05或P<0.01);各浓度组巨噬细胞TLR-4mRNA表达量无显著变化(P>0.05);各浓度组巨噬细胞TLR-5mRNA表达量显著升高(P<0.01)。(2)经LPS活化的巨噬细胞TNF-α、NO分泌降低(P<0.05或P<0.01),iNOS表达量显著降低(5%-10%含药血清组)(P<0.01),而IL-6分泌则降低(10%含药血清组)(P<0.01)或增加(20%含药血清组)(P<0.01);与同浓度组未经LPS活化的巨噬细胞比较:(1)正常血清5%-20%各浓度组经LPS活化的巨噬细胞TNF-α、IL-6、NO分泌及iNOS表达量增加(P<0.05或P<0.01);(2)紫花地丁含药血清5%-20%各浓度组经LPS活化的巨噬细胞NO分泌量显著降低(P<0.01),TNF-α分泌量、iNOS表达量在5%含药血清浓度组降低(P<0.01)、而在10%和20%浓度组升高(P<0.01),IL-6分泌量在5%含药血清浓度组降低(P<0.01)、而在20%浓度组升高(P<0.01),结论:1.紫花地丁含药血清对巨噬细胞产生TNF-α、IL-6、NO和表达iNOS的干预作用,可能是其调控炎症反应过程的重要机制。2.紫花地丁含药血清对巨噬细胞吞噬功能具有明显促进作用,其机制可能与该药调控巨噬细胞部分TOLL样受体表达有关。
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