α-1?/4-岩藻糖基转移酶的研究:1.基因克隆、天达及酶纯化2.酶抑制剂设计、合成及评估

来源 :中国科学院上海有机化学研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fsswczc
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该论文从幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori)韩国型菌株51和137中克隆并表达了二个不同的α-1,3/4-岩藻糖基转移酶.DNA和氨基酸顺序分析表明:这二个酶与哺乳动物的α-1,3-岩藻糖基转移酶的氨基酸同源性为20~30﹪,与已经报导了幽门螺旋杆菌α-1,3-岩藻糖基转移酶的氨基酸同源性为70~80﹪.这二个α1,3/4-岩藻糖基转移酶具有岩藻糖基转移酶特有的保守区域,但在C端都含有特征的类亮氨酸拉链结构.当用100mM Tris-HCl为缓冲液时,该酶的pH值为7.0.锰离子浓度为2mM.假定岩藻糖糖基部分和鸟嘌呤碱基部分是酶的底物识别部位,该论文用7种不同的天然氨基酸取代了GDP-岩藻糖的焦磷酸部分,设计并合成了20个化合物.测试了其中7个化合物的酶抑制活性,其活性在K<,t>在99~204μM之间.
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