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目的：①研究纳米磁性材料Mn0.5Zn0.5Fe204（锰锌铁氧体）制备及表征；②研究As203/Mn0.5Zn0.5Fe204纳米热控释脂质体的制备工艺及特性检测；③As203/Mn0.5Zn0.5Fe204纳米热控释脂质体联合交变磁场热疗治疗乳腺癌的体外实验研究；④初步探讨纳米热控释脂质体联合热疗体外诱导凋亡的分子机制。
方法：①采用改良的化学沉淀法制需纳米磁性材料Mn0.5Zn0.5Fe204（锰锌铁氧体），用透射电镜(transmission electron microscope，TEM)，扫描电镜(scanning electron microscope，SEM)、X射线衍射分析(x-ray diffractioN,XRD)，能谱仪(energy dispersive spectrometer,EDS)对制备的纳米磁性材料进行分析表征，并在高频交变磁场(AMF)下检测Mn0.4Zn0.5Fe204的升温情况。MTT实验检测其细胞毒性。②采用改良的薄膜分散加高压均质法制备As203/Mn0.5Zn0.5Fe204纳米热控释脂质体，用透射电镜、扫描电镜、能谱仪、原子荧光光谱仪、激光粒度分析仪、差热分析仪对其进行了特性研究。③将单纯培养液空白对照组、纳米As203脂质体组、纳米Mn0.5Zn0.5Fe204脂质体联合交变磁场热疗组、As203/Mn0.5Zn0.5Fe204纳米热控释脂质体非联合交变磁场热疗组及As203/Mn0.5Zn0.5Fe204纳米热控释脂质体联合交变磁场热疗组作用于乳腺癌MDA-MB-231细胞株，以证明As203/Mn0.5Zn0.5Fe204纳米热控释脂质体联合交变磁场升温后能够释放药物以达到化疗、热疗共同抗肿瘤的效果，并用透射电镜观察纳米热控释脂质体联合交变磁场热疗处理细胞后的形态学改变、MTT法研究处理后细胞的增殖抑制作用、流式细胞仪测定处理后细胞的凋亡率。④用RT-PCR及Western blot方法检测各处理组处理细胞后Bcl-2和Bax基因的表达改变。
结果：①制备所得的纳米磁性材料Mn0.5Zn0.5Fe204粒径约20-30nm，磁响应性较好，能谱分析其包含锰、锌、铁三种元素，且MN,ZN,Fe元素的摩尔比约为1:1:4:XRD显示制备的Mn0.5Zn0.5Fe204各衍射峰所对应的面间距（d值）与粉末衍射标准联合会(JCPDS)编制的代表物质为尖晶石型磁性的PDF(Powder Diffraction File)卡片d值吻合一致，检索数据库证明为锰锌铁氧体。在交变磁场下，一定浓度的Mn0.5Zn0.5Fe204可升温至45℃并保持恒定，且37℃所制备的浸渍液无细胞毒性。②As203/Mn0.5Zn0.5Fe204纳米热控释脂质体粒径为103.8nm，大部分为单室，进行能谱分析单个脂质体含有锰、锌、铁、磷和砷等成份，As203的药物包封率为82.16％，相变温度峰值为42.52℃，在达到相变温度之前几乎无药物释放，到达相变温度时释药率达到85％以上。③As203/Mn0.5Zn0.5Fe204纳米热控释脂质体联合交变磁场热疗作用于人乳腺癌细胞株后对其生长具有强烈的抑制作用并具有诱导其凋亡的作用，MTT结果显示该组细胞的生长抑制率(66.53％)明显高于纳米As203脂质体处理组(20.57％)、纳米Mn0.5Zn0.5Fe204脂质体联合交变磁场热疗组(43.40％)、As203/Mn0.5Zn0.5Fe204纳米热控释脂质体非联合交变磁场热疗组(25.49％)，而空白对照组则对细胞生长无抑制作用。流式结果也显示该组的凋亡率(40.33％)明显高于纳米As203脂质体处理组(凋亡率13.30％)、纳米Mn0.5Zn0.5Fe204脂质体联合交变磁场热疗组(凋亡率17.68％)及As203/Mn0.5Zn0.5Fe204纳米热控释脂质体非联合交变磁场热疗组(凋亡率16.25％)。④RT-PCR及Western blot 结果显示，与空白对照组相比，各治疗组对乳腺癌MDA-MB-231细胞的Bcl-2基因的表达有抑制作用，对Bax基因的表达有促进作用（Bcl-2/Bax比值降低）。
结论：①采用改良的薄膜分散加高压均质法成功制备了As203/Mn0.5Zn0.5Fe204纳米热控释脂质体，且在高频交变磁场中能升温达到热疗肿瘤的合适温度。②体外细胞实验证实As203/Mn0.5Zn0.5Fe204纳米热控释脂质体联合交变磁场作用于人乳腺癌细胞株后对其生长具有强烈的抑制作用并具有诱导其凋亡的作用。③RT-PCR及Western blot结果显示，As203/Mn0.5Zn0.5Fe204纳米热控释脂质体诱导乳腺癌细胞凋亡作用可能与其改变Bcl-2和Bax基因表达（Bcl-2/Bax比值降低）有关。本实验所研究的As203/Mn0.5Zn0.5Fe204纳米热控释脂质体联合变变磁场具有热疗、化疗、热控释、磁靶向多重优点，为乳腺癌的治疗提供了一条新途径。