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目的探讨抗中性粒细胞髓过氧化物酶抗体(MPO-ANCA)相关性血管炎(MPO-AAV)外周血中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)合成、表达以及释放的变化在MPO-AAV发病机制中的作用,初步分析其临床意义。方法选择50例初发未治且疾病处于活动期的MPO-AAV患者作为病例组,记录患者的临床指标、脏器损害情况及伯明翰血管炎活动度积分(BVAS)。从我院体检中心,同期随机选取50例性别、年龄相匹配的健康者为对照组,运用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测病例组及健康对照组外周血中MPO-ANCA、补体C5a片段(C5a)、MPO水平。患者及健康对照内随机选取20例,运用实时荧光定量(RT-q PCR)测定两组外周血中性粒细胞MPO-m RNA水平,流式细胞术(FCM)测定胞内MPO水平。比较病例组及健康对照组间各指标组间差异,分析病例组各指标间及其与血管炎临床疾病活动度、脏器损害间的关系。结果1.50例入选的MPO-AAV患者(病例组)中45例诊断为MPA,余5例诊断为GPA,男:女=22:28,年龄36-90(64.46±12.84)岁,病程0.6-120[(0.71,113.40)]个月。患者的主要损害脏器中,以肺脏和肾脏受损最多见,其中肺脏受损有42%(21/50),肾脏受损有96%(48/50),患者BVAS评分6~33(17.04±5.11)分,随机选取50例健康对照者,男:女=23:27,平均年龄为63.50±15.82岁,两组性别、年龄差异无统计学意义(分别为c2=0.04,P=0.841;t=-1.190,P=0.239))。从50例患者中随机选取20例患者,男:女=9:11,平均年龄为58.3±12.1岁,病程0-110[3(1,100)]个月,BVAS评分6~30(16.11±4.96)分,与总病例组患者的年龄、性别、病程及BVAS评分均无显著差别(分别为:t=-0.945,P=0.348;c2=0.006,P=0.939;Z=-0.502,P=0.615;t=-0.753,P=0.418)。随机选取20例健康者,男:女=7:13,平均年龄为60.75±16.20岁,与选取的病例组间性别和年龄差异无统计学意义(分别为:c2=0.418,P=0.518;t=-0.392,P=0.698)。2.ELISA结果显示,与对照组比较,病例组周围血中性粒细胞MPO、MPOANCA、C5a水平升高(分别为:572.13±386.87 vs 294.87±80.05,t=3.139,P=0.003;0.53±0.12 vs 0.24±0.08,t=10.591,P<0.001;398.37±71.5 vs 281.78±45.70,t=7.519,P<0.001)。RT-q PCR显示,与对照组比较,病例组中性粒细胞MPO-m R NA合成水平明显升高(22.60±7.78 vs 1.40±1.23,t=12.028,P<0.001)。FCM结果显示,与对照组比较,病例组中性粒细胞MPO表达水平明显降低(421.71±320.34 vs 3249.80±976.83,t=-12.303,P<0.001)。3.病例组中,中性粒细胞MPO-m RNA合成水平分别与血清MPO水平、MP O-ANCA水平显著正相关(分别为r=0.558,P=0.013;r=0.473,P=0.024),胞外MPO水平与胞内MPO水平显著负相关(r=-0.546,P=0.016),胞外MPO水平与MPO-ANCA、C5a水平显著正相关(分别为r=0.316,P=0.005;r=0.308,P=0.034),MPO-ANCA与C5a水平无显著相关性(r=1.95,P=0.328)。4.病例组中,中性粒细胞MPO-m RNA水平、MPO-ANCA水平、血清MPO水平分别与BVAS呈显著正相关(分别为r=0.455,P=0.011;r=0.361,P=0.037;r=0.326,P=0.034),C5a与BVAS无显著相关性(r=0.09,P=0.971)。5.病例组中,中性粒细胞胞内MPO-m RNA水平与ESR、CRP、中性粒细胞计数呈显著正相关(分别为r=0.271,P<0.001;r=0.342,P=0.026;r=0.314,P<0.001),与年龄、病程无明显相关性(分别为r=1.12,P=0.136;r=0.361,P=0.067)。结论1.MPO-AAV患者周围血MPO水平升高,提示患者中性粒细胞释放MPO增多。2.MPO-AAV患者中性粒细胞内MPO的表达水平明显降低,而MPO-m RNA合成水平与外周血MPO水平明显升高,提示中性粒细胞持续合成与脱颗粒释放MPO在MPO-AAV发病中可能发挥更重要的作用。3.MPO-ANCA可能通过促进中性粒细胞释放包含MPO的嗜天青颗粒,活化补体旁路途径,产生C5a进一步激活中性粒细胞,进而造成恶性循环参与MPO-AAV的发病。4.MPO-ANCA可能通过促进周围血中性粒细胞MPO的合成、释放,导致和加重MPO-AAV患者的临床损害。