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[背景]类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是以关节滑膜慢性炎症为主要表现的一种高度致残的自身免疫性疾病,炎性细胞因子在放大全身免疫紊乱和关节局部破坏中发挥很重要的作用,以TNF-α、IL-1β等为著,最终导致周围关节的慢性、对称性、侵蚀性关节炎以及关节外血管炎的表现。药物联合治疗仍是主要方法,而目前国际上常用的联合方案尚未达到令人满意的疗效。我们根据细胞动力学原理,首次在国内外联合细胞周期特异性药物甲氨蝶呤(methotrexate MTX)、来氟米特(leflunomide LEF)与周期非特异性药物环磷酰胺(cyelophosphamide CTX)小剂量按周期间歇给药治疗RA,经过10年的临床实践,取得了显著疗效,提高了临床缓解率,降低了副作用。为了从临床实践上升到理论认识,本课题开展了RA动物模型的实验研究,以联合用药从细胞因子的角度探讨其在胶原诱导性关节炎大鼠(collagen induced arthritis, CIA)中可能的免疫修复和免疫调节的作用机制。为RA的治疗提供新思路和方法。[目的]通过观察胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis, CIA)大鼠的症状和血清中炎性细胞因子IL-6和IL-17水平,比较单用药、周期特异性药物两两联合和周期特异性药物联合周期非特异性药物的疗效,得出何种治疗效果更佳,并探讨可能的机制。[方法]1.饲养SD大鼠,间隔两周分别给予两次皮内注射牛Ⅱ型胶原和弗氏完全佐剂混合液,建立CIA模型。2.将CIA大鼠,随机分为空白对照组、CIA对照组、MTX组、LEF组、CTX组、MTX+LEF组,MTX+CTX组,LEF+CTX组,接受不同治疗9周。3.动态观察接受不同治疗各组CIA大鼠症状(包括大体观、关节炎指数、关节肿胀程度)、影像病理学改变,于初次免疫后3W、6W、9W分别对各组大鼠采血,测定血清IL-6和IL-17水平。[结果]1.通过症状、影像病理学判断,78只接受造模的大鼠,发生对称性多关节炎的大鼠72只,造模成功率达92.3%；2.关节炎指数(AI)：各治疗组AI均较模型组明显改善(P<0.05)；各组AI改善程度MTX联合CTX组>LEF联合CTX组>MTX联合LEF组>MTX组>LEF组>CTX组；联合组AI改善程度均优于单药组(P<0.05)；联合组中,MTX联合CTX组、LEF联合CTX组AI改善程度均优于MTX联合LEF组(P<0.05)；单药组间无显著差异。3. X-ray摄片：各治疗组X线改变均较模型组为轻,联合治疗组X线疗效佳,均优于单药组,各联合治疗组之间及各单药组之间无显著差别。4.HE关节病理改变：CIA模型组大鼠的滑膜层次增多,可达6-8层,甚至10余层,排列紊乱,大量炎性细胞浸润,软骨、骨组织严重侵蚀；MTX联合LEF组、MTX、LEF、 CTX组在滑膜炎症、软骨及骨组织侵蚀的改善程度上依次减低,各组间无显著差异；MTX联合CTX组、LEF联合CTX组滑膜炎症、软骨及骨组织侵蚀改善程度较MTX联合LEF组、MTX、LEF、CTX组显著(P<0.05)。5.通过对各组大鼠血清IL-6和IL-17数据进行析因设计分析得出周期特异性药物(MTX、LEF)与周期非特异性药物(CTX)联合使用具有协同作用。[结论]1.MTX或LEF联合CTX在控制CIA大鼠关节炎症状和抑制体内血清中IL-6和IL-17的水平明显优于单用药组及MTX+LEF组。2. MTX、LEF周期联合CTX存在药物交互作用,提示MTX、LEF和CTX周期联合治疗为协同效应。