MST1R作为索拉非尼耐药性HCC治疗的潜在靶标可能性的研究

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目的检测MST1R(Macrophage Stimulating 1 Receptor)在肝癌细胞和索拉非尼耐药性肝癌细胞中的基础表达水平,确定MST1R对索拉非尼耐药性肝细胞癌增殖和凋亡的影响及作用机制,并探讨其作为临床治疗索拉非尼耐药性肝癌的潜在靶点的可能性。方法1、将细胞长期暴露于增加浓度的索拉非尼培养环境中建立索拉非尼耐药细胞株(SR),应用人受体酪氨酸激酶磷酸化阵列检测Hep G2和Hep G2-SR细胞中酪氨酸激酶的磷酸化水平;应用免疫印迹技术检测MST1R和p-MST1R在肝癌细胞和索拉非尼耐药性肝癌细胞中的基础表达。2、通过RNA干扰技术敲减MST1R,应用MTT、长期集落形成实验、Ed U标记技术、FITC-Tunel和流式细胞术检测MST1R对索拉非尼耐药性肝癌细胞的增殖和凋亡的影响。3、在动物水平建立索拉非尼耐药性HCC异种移植模型,将动物分为四组:空白组、索拉非尼组、BMS-777607(MST1R抑制剂)组和BMS-777607/索拉非尼组,按照一定药物浓度对裸鼠进行灌胃处理,一段时间后将瘤组织取出进行免疫组化染色,观察比较四组结果。结果1、MST1R的过度激活可能导致HCC细胞发生索拉非尼耐药;2、MST1R表达降低抑制索拉非尼耐药性细胞的增殖能力;3、MST1R表达降低促进索拉非尼耐药性细胞的凋亡;4、在体内抑制MST1R的表达可以增强索拉非尼耐药性细胞对索拉非尼的敏感性。结论MST1R在索拉非尼耐药性细胞中过度激活并促进细胞增殖、抑制凋亡,应用MST1R阻断剂可以增强索拉非尼耐药性细胞对索拉非尼的敏感性。
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