四川藏区藏药“渣玛”的质量标准研究

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藏药“渣玛”来源于豆科锦鸡儿属多种植物的根或茎皮,能排散肌肉热和脉热,成熟瘟疫热,清除隆热症。四川是全国第二大藏区,据调查,四川藏区使用的藏药“渣玛”主要有二色锦鸡儿(Caragana bicolor Kom.)和川西锦鸡儿(Caragana erinacea Kom.),但目前尚无质量控制标准,其生药研究鲜见报道。本文为配合2014年版《四川省藏药材标准》的制定,系统研究了二色锦鸡儿和川西锦鸡儿质量控制的各项指标,内容包括:来源、性状、鉴别(显微鉴别、薄层色谱鉴别)、检查(水分、总灰分、酸不溶性灰分)、浸出物测定等,同时,还进行了其安全性评价和抗炎、镇痛的药效初步研究,在此基础上,结合药材质量标准制定的技术要求,拟定了藏药“渣玛”的质量标准,其中部分内容已收入2014年版《四川省藏药材标准》。主要研究内容及结果如下:1.本文首次对二色锦鸡儿和川西锦鸡儿进行了较为详细的形态组织学研究。原植物形态上,主要从植株高度、复叶类型、小叶对数、叶轴形态、针刺长度、花梗着生方式、花的颜色形态、果实等方面进行鉴别;药材性状上,主要从大小、表面颜色和纹理、质地、断面形态等方面进行鉴别;显微鉴别方面,根横切面主要从木栓层细胞、韧皮部和木质部的比例、韧皮部晶鞘纤维、木质部导管和纤维的排列方式等进行鉴别;粉末镜检主要从晶纤维、导管、草酸钙方晶等进行鉴别。2.以p-谷甾醇和对照药材共同作为对照,建立了“渣玛”药材的薄层色谱鉴别方法。以石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯-甲酸(5:1:0.06)为展开剂,分离效果好,展开后Rf值适中,色谱斑点清晰。通过对6批不同产地二色锦鸡儿和10批不同产地川西锦鸡儿样品进行薄层色谱试验,表明所建立的方法对“渣玛”药材鉴别有较好的适应性,重现性好。3.按照《中国药典》2010年版一部附录项下方法,对16批不同产地二色锦鸡儿、川西锦鸡儿样品进行了杂质、水分、总灰分、酸不溶灰分的检查,根据测定结果,结合生产、应用实际,拟订了其限量标准:杂质不得过2.5%,水分不得过9.0%,总灰分不得过5.0%,酸不溶性灰分不得过2.0%。4.通过对溶剂的选择、不同浸出方法的对比,建立了“渣玛”药材的浸出物测定方法。以75%乙醇做溶剂,热浸法测定。根据6批不同产地二色锦鸡儿和10批不同产地川西锦鸡儿样品的测定结果,结合生产应用实际,拟定其含量限度为不得低于8.0%。5对二色锦鸡儿根、川西锦鸡儿根进行了大类化学成分系统预试。通过试管反应、圆形滤纸层样预试及硅胶G薄层预试,初步判断二色锦鸡儿根中含有蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、皂苷、苷类、酚类、有机酸、鞣质、甾体、三萜类、油脂、甾醇等化学成分:川西锦鸡儿含有氨基酸、多肽、蛋白质、多糖、苷类、皂苷、有机酸、黄酮类、酚类、鞣质、甾体、三萜类、油脂、甾醇等化学成分。为后续研究奠定了基础。6首次进行了二色锦鸡儿、川西锦鸡儿的安全性评价和抗炎、镇痛的药效研究,为藏医临床用药提供了参考依据。6.1安全性评价实验结果显示二色锦鸡儿根的小鼠一次灌胃给药最大耐受量大于166.8g/kg,约为成人日用量的122倍;川西锦鸡儿根的小鼠一次灌胃给药最大耐受剂量大于150g/kg,约为成人日用量的109倍。结果表明二色锦鸡儿根、川西锦鸡儿根日常使用安全性良好。6.2以二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型,研究二色锦鸡儿根与川西锦鸡儿根的抗炎作用。结果显示:地塞米松组以及二色锦鸡儿高、中剂量组小鼠耳廓肿胀度与模型对照组相比有显著差异(**P<0.01);川西锦鸡儿低剂量组与模型对照组相比有显著差异(*P<0.02)。6.3以腔注射冰醋酸致小鼠扭体反应模型,研究二色锦鸡儿根与川西锦鸡儿根的镇痛作用。结果显示:从潜伏期来看,阿司匹林组和川西锦鸡儿高剂量组潜伏期与模型组呈显著差异(**P<0.01);从扭体反应次数来看,阿司匹林组、二色锦鸡儿根高、中、低剂量组以及川西锦鸡儿高、中、低剂量组与模型组相比都呈显著差异(**P<0.01)。
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