天然产物中有效成分的高压均质提取和高速逆流色谱分离技术研究

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天然药物是药物的一个重要组成部分。在我国,天然药物又称中草药,传统中药的研究、生产、使用在我国已有悠久的历史,是中华民族优秀文化和科技的璀璨瑰宝。中草药化学成分较为复杂,所以想要研究和应用其中的有效成分,必须将它们从中草药中提取出来进一步分离和精制,得到有效成分的单体。因此,中草药中有效成分的提取、分离和鉴定已日益成为中药现代化的重要研究方向。本文提出了应用高压均质技术提取天然产物中有效成分和用高速逆流色谱分离纯化其有效成分的新方法,以土豆叶中的茄尼醇和龙胆草中的龙胆苦苷和獐芽菜苦苷提取分离为研究对象,通过实验找到并优化了高压均质提取和高速逆流色谱分离的最佳条件。本文探讨了高压均质提取的机理,采用高压均质提取、常规热回流提取、超声提取三种方法分别提取土豆叶中的茄尼醇和龙胆草中的龙胆苦苷和獐芽菜苦苷,用高效液相色谱检测其中目标物质的含量来计算提取效率,比较各种方法的提取效率,证实高压均质提取比常规提取方法的提取效率高,并考察影响高压均质提取的主要因素,通过正交实验优化了高压均质提取的条件。土豆叶的粗提物用高速逆流色谱(HSCCC)对其中的茄尼醇组分进行分离纯化,用正已烷:甲醇=10:7(V/V)作为两相溶剂系统,经过两步HSCCC分离,从60mg土豆叶粗提物中得到了5mg纯度为98.7%的茄尼醇;龙胆草的粗提物用高速逆流色谱(HSCCC)对其中的有效成分进行分离纯化,用正已烷/正丁醇/甲醇/0.4%的乙酸水溶液(1.4:8:3:15.5,V/V)作为两相溶剂系统,经过一步HSCCC分离从50mg龙胆草粗提物中得到了4mg纯度为96.7%的末知化合物,8mg纯度为97.1%的獐芽菜苦苷,18mg纯度为98.4%的龙胆苦苷和11mg纯度为96.2%的三叶苷。高压均质提取和高速逆流色谱分离技术具有设备简单,操作方便,提取分离简便快速,提取效率高、分离效果好等优点,通过本实验证明应用高压均质技术提取天然产物中有效成分和用高速逆流色谱分离纯化其有效成分的方法是完全可行的,为中药有效成分的提取分离提供了一条新的途径。
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