牛肝菌是森林生态系统中的重要生物类群之一，菌丝体与植物根系结合形成菌根，使植物生长成为可能，使不同种类植物的根系联在一起，有助于提高森林生态系统中植物的多样性、稳定性和生产力，增加植物-土壤间的联系，改善土壤结构，促进土壤微生物生长，增强植物器官的功能，促进造林或育苗成活与生长。牛肝菌中的许多种类是分布极广的具有经济价值的著名药食两用真菌，具有很高的营养价值和独特的药用价值。开展牛肝菌子实体的诱导和栽培研究是国内外微生物和食用菌研究人员十分关注的研究课题。牛肝菌人工驯化栽培的关键是批量生产纯菌种，其难点是难以获得纯菌种以及菌种生长速度缓慢。基于此，本文对乳牛肝菌的子实体进行了菌种分离和分子鉴定，并研究了菌种培养、发酵液产酶情况以及乳牛肝菌子实体内部及附生微生物的多样性。主要研究内容如下： 1．乳牛肝菌菌种的分离及鉴定：采用组织分离法从乳牛肝菌子实体分离得到纯培养菌丝体，由于乳牛肝菌是外生菌根菌，无法人工栽培，而传统的形态学方法难以鉴定其真伪，故采用ITS序列分析方法对其进行分子鉴定，同时构建进化树，初步分析乳牛肝菌的系统发育关系。 2．乳牛肝菌菌种的培养：对牛肝菌母种培养基进行筛选试验，开展液体和固体培养研究。结果表明：牛肝菌母种在葡萄糖蛋白胨培养基基上生长最好，可用此培养基进行乳牛肝菌的液体发酵；对多种固体培养基的培养比较实验表明，乳牛肝菌在麦粒培养基上生长最好，在甘蔗渣培养基上长势次之，而在其它几种培养基上未生长。 3．乳牛肝菌液体培养的胞外酶活性研究：测定了乳牛肝菌液体培养时的胞外酶活性，并同时与几种白腐真菌的胞外酶活性作对比。结果表明乳牛肝菌在整个培养过程中不产纤维素酶、半纤维素酶和漆酶，而这几种酶都存在于几种白腐真菌树舌、金针菇和灵芝中。 4．乳牛肝菌内生及附生微生物多样性研究：用玻璃粉吸附法提取出乳牛肝菌、美味牛肝菌和硬皮马勃子实体及根际土壤的总DNA，并以此为模板，对16srRNA基因V₃区和18s RNA基因的ITS区进行PCR扩增，用DGGE技术对PCR产物进行分离，从而得到数目不同且分离的电泳条带。结果说明三种外生菌根菌子实体及根际微生物类群略有不同，乳牛肝菌根际土壤真菌种类较为丰富一些。 综合以上结果，作者认为乳牛肝菌菌种分离困难及生长缓慢的原因与其胞外降解酶活性低及子实体含有内生或附生微生物有关。