目的:基质重塑相关基因7(MXRA7)是基质重塑相关基因家族的一个成员,于2003年首次被提出并命名。课题组现有的研究表明该基因影响细胞分化、组织修复等多个方面,且在急性早幼粒细胞白血病中也有一定作用。通过对公共数据库的分析,我们发现在急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)中,MXRA7表达相对较高,提示该基因可能在此疾病中有所作用。因此本课题使用两株急性B淋巴细胞白血病细胞系REH和697,对该基因进行研究。方法:(1)使用BloodSpot与Leukemia Gene Atlas两个在线开放公共数据库搜索查询MXRA7在B-ALL中表达情况。(2)收集急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)与正常人(Normal)的骨髓样本、B-ALL细胞系样本,通过Real-time qPCR和Western Blot的方法对比MXRA7表达情况。(3)使用慢病毒系统,构建MXRA7敲低的REH和697细胞系。通过Real-time qPCR与Western Blot的方法对敲低效果进行确认。(4)对构建的REH和697细胞系进行细胞活力、细胞周期测定,探究MXRA7对REH和697细胞增殖能力的影响。(5)使用Transwell方法检测MXRA7对两株细胞系的侵袭能力的影响,并通过Real-time qPCR检测基质金属蛋白酶(MMP)家族成员的表达。(6)分别使用阿糖胞苷(AraC)和柔红霉素(DNR)对REH和697细胞进行处理,检测MXRA7对其耐药性的影响。(7)利用流式细胞术对MXRA7敲低后的REH和697细胞表面CD38的表达进行检测。结果:(1)通过对数据库的分析,发现MXRA7在B-ALL,特别是前体B急性淋巴细胞白血病(BCP-ALL)有着相对较高的表达水平。(2)B-ALL患者与正常人对比,MXRA7在mRNA水平和蛋白质水平均高表达。(3)通过流式分选建立了 GFP 阳性的 REH-shNC、REH-shMXRA7、697-shNC、697-shMXRA7四株稳转细胞系。Real-time qPCR和Western Blot检测结果都验证了 MXRA7敲低细胞系构建成功。(4)CCK-8法测定细胞活力的结果显示MXRA7敲低后697细胞的活力未发生明显变化,而REH的细胞活力增强。细胞周期测定结果显示两种细胞的周期均未发生明显的改变。(5)细胞侵袭实验结果显示,MXRA7敲低后REH侵袭能力未见明显变化,且MMP-2、MMP-8、MMP-9的表达变化不一致;而697细胞侵袭能力出现减弱趋势,其MMP-2、MMP-8、MMP-9表达均下降。(6)使用化疗药物阿糖胞苷(AraC)和柔红霉素(DNR)对REH和697细胞进行处理,MXRA7敲低后两种细胞的凋亡比例提升,且相关凋亡通路蛋白Caspase3/8/9 活性增加。(7)CD38的检测结果显示,在敲低MXRA7后,697细胞的CD38表达比例下降,而REH没有变化。结论:本研究发现,MXRA7在B-ALL中高表达,还可通过调控细胞凋亡蛋白的表达影响B-ALL细胞的耐药性,并且影响与B-ALL不良预后相关的CD38分子的表达,提示该基因可能会影响B-ALL的发生发展,推测MXRA7的表达可能是难治性急性B淋巴细胞白血病的因素之一。