新生大鼠原代肝细胞分离和培养实验研究

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目的:尝试建立分离并获得稳定培养的新生大鼠原代肝细胞(Hepatocyte,HC)的简易方法。研究方法:采用多步酶消化法分离大鼠原代HC,经低速离心、选择性贴壁法纯化及培养肝细胞。结果:最初获得单细胞数量约1~2×10~6个/只,经0.4%台盼蓝染色细胞瞬时活率>70%,细胞悬液贴壁生长培养,在3~5 d细胞可长满瓶底的70%~80%,原代肝细胞经传代纯化、糖原染色和抗CK-18免疫组化染色鉴定,发现HC纯度>95%,细胞生长状态良好。结论:成功建立了分离、培养原代HC的简易方法,细胞数量、纯度、活率较好,可供一般实验室应用,为肝脏疾病的研究提供基本保障。
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