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背景:乙肝相关性肝移植术后乙肝复发率高居不下,核苷类似物联合乙肝免疫球蛋白容易引起病毒耐药株产生,同时亦给患者带来沉重的经济负担,乙肝疫苗的应用不仅减轻患者的经济压力还让患者看到了停用抗病毒药物及乙肝免疫球蛋白的可能,但目前肝脏移植术后免疫抑制剂的使用,导致乙肝疫苗治疗有效性较差,因此寻求新的乙肝肝移植术后预防乙肝病毒复发的方法就尤为重要。提高患者主动免疫力抑制或清除HBV并预防HBV复发成为学者的研究热点,树突状细胞(Dendritic Cell,DC)是体内最主要的抗原递呈细胞(Antigen PresentCell,APC),其强大的抗原递呈能力是连接机体固有免疫和适应性免疫的桥梁,因此DC在各类病毒感染、肿瘤免疫中扮演着重要的角色,目前对肝移植受体术后DC的功能研究较为透彻,但对移植术前受体DC诱导主动免疫的机制尚不清楚。 目的:选择较好的体外培养DC方案,探讨乙肝相关性肝移植受者术前体外培养的单核细胞来源DC免疫表型、功能的变化,以初步探讨术前肝移植受体内DC诱导主动免疫的机制。 方法:比较DC生成培养基与传统培养方案诱导DC成熟的能力及表型、功能的变化,通过DC生成培养基体外诱导健康人和拟行肝移植的患者组DC,并分别负载乙肝表面抗原(Hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)和乙肝核心抗原(Hepatitis B virus core antigen,HBcAg)诱导成熟,比较两组DC形态、表型、刺激淋巴细胞的增殖能力及培养上清中白介素-12(IL-12)、IL-10分泌量的变化,并检测患者组中负载HBsAg和HBcAg抗原成熟的DC与未负载抗原成熟的DC诱导辅助性T细胞(T help cell,Th)极化的能力。 结果:与传统培养方案比较,DC生成培养基诱导培养的成熟DC得率及成熟标志分子CD83显著升高(P<0.05),同时DC生成培养基诱导成熟DC分泌IL-12水平显著升高(P<0.05)并显著提升自体T细胞增值能力(P<0.01)。 患者组的CD83水平显著低于健康组(P<0.01),HLA-DR及CD40/CD80/CD86等共刺激信号分子无显著差异(P>0.05)。患者组DC刺激自体T细胞增殖能力降低(P<0.05)。患者组与健康组DC分泌IL-12、IL-10无明显差异(P>0.05)。负载抗原后能更显著诱导T细胞极化(P<0.05)。 结论:DC生成培养基能更好在体外诱导DC表型及功能的成熟,乙肝相关性肝病肝移植患者术前DC的表型、功能受到一定的抑制,但在体外有效的负载抗原条件后亦能有效的诱导Th1应答,从而激活细胞免疫。