RT-PCR法检测CEA mRNA及CK19 mRNA在非小细胞肺癌患者外周血中微转移的表达研究

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目的:(1)检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中癌胚抗原mRNA (CEA mRNA)及细胞角蛋19 mRNA (CK19 mRNA)的表达情况并进行比较分析。(2)探讨CEA mRNA及CK19 mRNA作为分子标志物检测NSCLC微转移的可行性。方法:(1)选择48例NSCLC患者,15例肺良性疾病(BLD)患者和10例健康人的外周血作为样本。(2)采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测48例NSCLC患者,15例BLD患者和10例健康人外周血中CEA mRNA及CK19 mRNA的表达情况,并比较CEA mRNA及CK19 mRNA在NSCLC外周血中的表达与一般临床特征(性别、年龄、血型、吸烟史等)及病理参数(病理类型、分期、细胞分化程度、淋巴结转移等)之间的相关性。结果:(1)NSCLC患者外周血中CEA mRNA及CK19 mRNA的阳性表达率分别为58.33%(28/48)、68.75%(33/48),在BLD组中表达率分别为6.67%(1/15)、13.33%(2/15),而健康对照组外周血中均无表达(0/10), NSCLC组CEA mRNA及CK19 mRNA表达均高于BLD组及对照组,差异具有统计学意义(p<0.05)。(2)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期NSCLC患者外周血中CEA mRNA阳性表达率分别为27.8%(5/18)、83.3%(10/12)、61.5%(8/13)、100%(5/5),其阳性表达与临床分期(x2=13.626,p=0.003)及淋巴结转移(x2=20.378,p=0.000)密切相关,而与病理类型(x2=4.029,p=0.545)、细胞分化程度(x2=1.560,p=0.458)及一般临床特征(性别、年龄、血型、吸烟史)无关(p>0.05)。(3)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期NSCLC患者外周血中CK19 mRNA阳性表达率分别为44.4%(8/18)、75%(9/12)、92.3%(12/13)、80%(4/5),外周血CK19mRNA阳性表达与临床分期(x2=8.820,p=0.032)及淋巴结转移(x2=6.813,p=0.009)密切相关,而与病理类型(x2=4.655,p=0.459),细胞分化程度(x2=1.204,p=0.548)及一般临床特征(性别、年龄、血型、吸烟史)无关(p>0.05)。(4) CEA mRNA和CK19 mRNA两种标志物单独用于NSCLC外周血微转移的检测,差异无统计学意义(x2=3.017,p=0.082),但联合检测可提高检测的阳性率至81.25%(39/48),优于单一检测。结论:(1)即使是早期(Ⅰ、Ⅱ期)的NSCLC患者外周血中也有微转移的存在,说明微转移可能是NSCLC预后不良的原因之一。(2) CEA mRNA与CK19 mRNA均可作为检测NSCLC患者外周血微转移较为合适的分子标志物。(3)联合检测有助于提高检测的阳性率。
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