目的:以小牛血为原材料制备小牛血去蛋白提取物(DCBE),确定DCBE口腔凝胶处方及制备工艺,建立原料和制剂的质量标准,并对口腔凝胶进行药效学评价,给口腔溃疡患者提供一种可供选择的新产品。方法:(1)DCBE的原料研究:使用小牛血为原材料,通过去除纤维蛋白、破坏红细胞、高温使蛋白质变性、去除病毒、离心和超滤去除杂蛋白,浓缩、脱色等工艺得到DCBE原料,并对DCBE的结构组成、活性成分及质量进行研究和评价,采用氨基酸自动分析仪检测水解氨基酸和游离氨基酸,利用红外光谱和紫外光谱的方法测定DCBE特征结构,质谱法检定原料分子量,毛细管电泳法检测原料等电点;将DCBE原料与胸腺肽作液相对比分析研究,分析产品中的活性成分是否含有胸腺肽;采用酶联免疫法检测产品中的病毒,建立原料质量控制方法和质量标准,通过影响因素、加速实验、长期实验评价原料的稳定性。(2)DCBE口腔凝胶的处方和质量研究:在处方筛选和制备工艺中,根据原辅料的性质,进行了处方前研究,原辅料相容性研究、制剂pH稳定性研究、并采用抑菌效力检测法验证抑菌剂的选择,确定了DCBE口腔凝胶的处方组成;同时对产品的制剂工艺、灭菌工艺进行研究;建立制剂质量控制方法和质量标准,并对制备的三批制剂进行稳定性考察。(3)DCBE口腔凝胶的药效学评价:分别选取空白凝胶、DCBE口腔凝胶、西瓜霜治疗大鼠口腔溃疡,观察各组动物溃疡愈合情况;并对三组动物溃疡组织进行病理学观察,评价不同组别动物溃疡组织修复情况。结果:通过去除纤维蛋白、破碎红细胞、病毒灭活、去除大分子杂蛋白、浓缩、脱色后得到的DCBE工艺简单,呼吸活力高。对制备的DCBE进行表征研究,其游离氨基酸含量为79.2(mg/100 mL),水解氨基酸含量为247.9(mg/100 mL),红外和紫外光谱结果显示本品具有氨基酸和多肽的特征结构,在紫外区范围有强吸收峰;采用毛细管电泳法检测DCBE主要成分中含4.9的等电点;质谱法检测主要成分的分子量范围为300~2000Da;本品的活性物质中不含有胸腺肽成分,制备的原料中未检测出牛常规易感染病毒。通过对原料的研究,建立了DCBE质量标准,对制备的三批原料进行加速和长期稳定性考察,结果显示DCBE原料置于冷藏条件下24个月,产品质量稳定。通过处方研究,初步确定本品以1%CMC-Na为凝胶基质,0.01%糖精钠为矫味剂,0.03%羟苯乙酯为防腐剂。依据中国药典对凝胶剂的要求,拟定制剂的质量标准。对制备的三批制剂进行影响因素、加速和长期稳定性考察,考察结果提示本品在高温和强光照条件下黏度会有所下降,室温长期保存24个月对产品质量不产生任何影响。药效学研究结果显示,DCBE凝胶组对口腔溃疡愈合情况明显优于空白凝胶组和西瓜霜组,说明含小牛血去蛋白提取物组可以使溃疡粘膜组织愈合加快,HE染色结果提示DCBE组粘膜组织及上皮细胞结构完整,说明DCBE对受损皮肤、粘膜上皮细胞及血管内皮细胞具有修复和再生功能。结论DCBE制备工艺可行,质量可控,口腔凝胶制备工艺简单,产品质量稳定,药效明确。