【摘 要】
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本文研究模拟微重力(SMG)对骨髓间充质干细胞(BMSC)形态、细胞骨架、粘附性和细胞周期、MAPK/ERK通路、PI3K/AKT通路和mTOR通路的影响,探讨RhoA活性与模拟微重力效应之间的关系。在模拟微重力下培养C57/BL6小鼠BMSC,通过GST-CNFγ特异性维持RhoA活性,G-LISA RhoA活性检测试剂盒测定RhoA活性,免疫荧光染色检测微丝、核纤层蛋白LaminA和粘着斑蛋白
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本文研究模拟微重力(SMG)对骨髓间充质干细胞(BMSC)形态、细胞骨架、粘附性和细胞周期、MAPK/ERK通路、PI3K/AKT通路和mTOR通路的影响,探讨RhoA活性与模拟微重力效应之间的关系。在模拟微重力下培养C57/BL6小鼠BMSC,通过GST-CNFγ特异性维持RhoA活性,G-LISA RhoA活性检测试剂盒测定RhoA活性,免疫荧光染色检测微丝、核纤层蛋白LaminA和粘着斑蛋白(Vinculin)变化,Western blot检测RhoA蛋白、Vinculin、CyclinB1、p-ERK、p-AKT、p-mTOR、eIF4E变化情况。结果显示,模拟微重力可造成RhoA活性下降,并造成细胞形态和细胞骨架改变,粘附性下降,细胞周期抑制,MAPK/ERK通路、PI3K/AKT通路和mTOR通路抑制。CNFγ可以维持RhoA活性,较单纯模拟微重力组,模拟微重力加CNFγ处理组上述细胞改变在一定程度上得以逆转,表明模拟微重力可能通过抑制RhoA活性影响细胞骨架和粘附。RhoA活性降低,细胞骨架被破坏后,可进一步影响MAPK/ERK通路、PI3K/AKT通路和mTOR通路的信号转导,由此说明微重力破坏细胞骨架,产生增殖抑制等效应与RhoA活性的介导有关。
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