产菊粉酶菌株的筛选及其产酶与菊粉乙醇发酵条件的优化

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cool_lei
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:本研究从新疆石河子地区菊芋根部土壤中分离,筛选纯化得到产菊粉酶菌株,对其进行60Co诱变使其产酶活力提高,通过筛选得到一株高产菊粉酶菌株,对其产酶条件进行响应面法优化。结合啤酒酵母进行乙醇发酵,经过60Co诱变选育出高产菊粉酶活的菌株,并确定菊芋乙醇发酵确定最佳培养条件,从而为菊芋乙醇工业化生产奠定理论基础。  方法:(1)采集菊芋根部土壤,利用选择性培养基进行培养,采用平板法和有限稀释法进行产菊粉酶菌株的分离纯化。(2)对分离得到的菌株进行酶活测定,选取一株产菊粉酶的菌株进行60Co诱变选育,获得一株高产菊粉酶菌株。(3)设计试验对产酶条件进行优化,本实验在单因素实验的基础上设计Plackett-Burman(PB)试验,根据Plackett-Burman(PB)实验结果,选择显著影响因子,利用最陡爬坡实验确定显著影响因子的中心点,以最陡爬坡实验的结果作为Central Composite Design(CCD)响应面试验设计的中心点,进行响应面优化实验。运用Design-Expert8.0软件及origin8.0软件进行数据统计处理和作图。  结果与结论:  1.本实验成功的从新疆石河子市地区菊芋生长的盐碱地中,使用有限稀释法经过平板稀释涂布、挑取单菌落经过划线培养,得到12株能够产生菊粉酶的菌株。对获得的菌株所产菊粉酶酶活进行测定,其中有一菌株所产菊粉酶具有较高酶活,其酶活达到17.2U/mL,将此菌株命名为G-60。以菌株G-60为产菊粉酶出发菌株,进行60Co诱变,使其产菊粉酶能力提高。  2.分别选取0Gy、8000Gy、1000Gy和12000Gy剂量的60Co对菌株G-60进行照射诱变。经过60Co照射诱变后,分别取100ul诱变孢子悬液,经过适当稀释后涂平板筛选出正向突变株,经过传代培养后测定其产酶能力达到31.1U/mL是诱变前17.2U/mL的1.8倍,将其命名为G-60’。  3.菌株G-60’产酶条件的优化,在Plackett-Burman(PB)实验设计的基础上,运用最陡爬坡试验设计,确定Central Composite Design(CCD)响应面设计试验中心,对菊粉浓度、蛋白胨以及装液量三个影响显著的因素进行响应面优化试验,建立了菌株 G-60’所产菊粉酶酶活的二次多项式回归模型,通过响应面法分析了该模型的有效性和可靠性与各因素之间的交互作用,获得了菌株 G-60’所产菊粉酶酶活的优化工艺条件为:菊粉66.5g/L、蛋白胨29.1g/L以及装液量49.4mL。在此工艺条件下,菌株G-60’所产菊粉酶酶活力达到67.8/mL,与优化前菌株G-60’所产菊粉酶酶活力31.1U/mL相比较提高了2.18倍。  4.以菌株G-60’为产酶菌株,啤酒酵母为乙醇发酵菌株,进行菊粉乙醇发酵,采用Plackett-Burman(PB)实验设计及Central Composite Design(CCD)响应面实验设计优化发酵条件,使乙醇浓度和菊粉利用率达到最大值。通过Plackett-Burman(PB)筛选得到菊粉浓度、装液量和发酵时间为影响乙醇发酵和菊粉利用率的显著因素,利用Central Composite Design(CCD)响应面优化,建立了菊粉利用率及乙醇浓度的多元二次多项式数学回归模型,分析了模型的有效性与各因素间的交互作用,对回归方程进行寻优得到了菊粉乙醇发酵中菊粉利用率的最佳工艺参数为:菊粉175.4g/L、装液量102.5mL、发酵时间75.0h,在此条件下,菊粉利用率可达到92.2%;当菊粉浓度、装液量和发酵时间的值分别为175.1g/L、102.5mL和75.7h时乙醇浓度可达到最大值81.3g/L。结合实际实验条件,选取菊粉浓度175.0g/L、装液量100.0mL、发酵时间75.0h,对此多元二次回归模型进行了验证试验,试验结果与预测值接近,说明该响应面模型能较好的预测菊粉乙醇发酵中菊粉利用率和乙醇浓度的实际情况。
其他文献
随着西部油田进入机械采油阶段,深井与超深井抽油的需要将日益迫切,进一步研制超高强度抽油杆,提高抽油杆的强度和疲劳性能,改进抽油杆的制造工艺,已被确定为中国今后有杆抽
随着我国石油工业水平的不断提高,我国已成为世界钻井最多的三大国家(美国、加拿大、中国)之一。在钻井和采油、气的过程中,套管和油管是最主要的施工材料,油套管(油管和套管
该课题通过对苷蔗生长情况的调查和对进口样机整杆式甘蔗收割机B80-130的田间试验情况的分析,以及现有样机存在的问题,确定能够收获倒伏甘蔗的收割机的设计参数和基本要求.为
聚亚苯基苯并二噁唑(PBO)具有高强度、高模量、高的热氧稳定性和环境稳定性.其性能几乎超越任何现有高性能高分子纤维,因而被誉为"纤维之王".这主要源于它的直棒状芳杂环特殊
该论文综合运用金属弹塑性变形的专业知识、数值模拟知识以及计算机应用和开发知识,以现有的大型通用有限元分析软件ANSYS作为二次开发平台,开发出适用于带芯棒钢管拉拔过程
自古以来,农业科学技术是农业发展的第一推动力,农业科技的发展,也象征着人类文明的进步,农业生产力的提高。随着互联网、物联网产业的发展,信息化理念逐步渗透到农村科技服
本研究采用高分辨扫描电镜、透射电镜对稀土钼/钨阴极材料的显微结构进行了系统研究;利用本课题研究组设计研制的电子发射测量仪对La2O3-Mo,La2O3-Sc2O3-Mo,La2O3—Y2O3-Mo三种阴
该文阐明了电镀Ni-Mo-P合金的沉积原理及其在金属表面上的沉积工艺;分析研究了镀液温度、pH值和阴极电流密度对沉积速度和镀层性能的影响;还研究了热处理温度对合金镀层的组
农村问题是我国经济社会发展过程中面临的最重要的课题,农村问题的解决最终要靠体制改革和制度创新,我国农村问题的解决具有长期性、艰巨性和复杂性等特点。乡村旅游是解决农村
在微污染水的深度处理中,目前国内外普遍采用的工艺是臭氧氧化+活性炭吸附(O3+AC)组合工艺。该项技术已经有很多较为成熟的经验,但是也具有一定的局限性,如耗能大,投资费用较高,对