少动鞘氨醇单胞菌（Sphingomonas elodea JLJ）发酵产生的结冷胶（gellan gum）是一种高分子线性阴离子型胞外荚膜多糖。其具有良好的耐热性、耐酸碱性、无毒无害等性能,广泛应用于各种领域。在结冷胶发酵生产过程中,随着结冷胶的积累,发酵液会变得越发粘稠,因此其发酵过程中的溶氧供需矛盾一直是一个亟待解决的严峻问题。本研究拟采用CRISPR/Cas9技术将透明颤菌血红蛋白（vgb）基因敲入少动鞘氨醇单胞菌细胞内改造其代谢网络,从而提高菌株摄取和利用氧的能力,解决结冷胶发酵过程中氧的供需矛盾,有效提高结冷胶产量;对重组菌株的发酵培养基和发酵条件进行改造,最终使得结冷胶的产量得到显著提高。主要研究结果为:（1）通过PCR法扩增获得乙酰基转移酶基因（nat）片段,确定菌株JLJ基因组中存在nat基因,选定其为靶位点。（2）通过CRISPR/Cas9技术对菌株JLJ进行改造,将透明颤菌血红蛋白基因（vgb）敲入基因组中,并将nat基因敲除,获得重组菌株JLJ-vgb。PCR、SDS-PAGE以及CO差光谱分析均表明vgb基因已成功敲入菌株JLJ基因组中,并成功表达有活性的血红蛋白（VHb）。（3）通过单因素试验和响应面优化试验,确定重组菌株JLJ-vgb最适发酵培养基为:可溶性淀粉7%,黄豆饼粉0.55%,KH₂PO₄ 0.05%,K₂HPO₄ 0.05%,MgSO₄ 0.06%,pH7.0;最适转速为200 r/min。在此条件下,重组菌株JLJ-vgb产胶量为41.62±1.72 g/L,比出发菌株提高了127.32%。