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目的：①对一例反复发作静脉血栓患者进行表型研究及家系调查。②对该患者及家系成员的AT基因进行测序分析，寻找致病突变，并对其分子发病机制进行初步研究。
方法：⑴采用免疫比浊法和发色底物法分别检测先证者及其家系成员的AT抗原（AT：Ag）和AT活性（AT：A）。⑵提取患者及其家系成员外周血基因组DNA， PCR扩增AT基因（SERPINC1）7个外显子及其侧翼序列，利用直接测序法对先证者进行AT基因序列分析。针对先证者中发现的突变位点，对其家系成员进行相应基因突变检测，同时在100例正常人中筛查以排除多态性。⑶以正常pcDNA3.1（-）/ATcDNA质粒为模板，利用定点突变技术构建AT突变体表达质粒。 将正常pcDNA3.1（-）/ATcDNA质粒以及AT突变体表达质粒分别瞬时转染COS7细胞并进行培养。收集COS7细胞培养上清液和细胞裂解液， 使用ELISA方法检测AT：Ag。
结果：①先证者AT：Ag和AT：A分别为114mg/L和54.8％，其AT基因外显子2区发现了2个杂合点突变，分别为c.134G>A和c.342T>G，其家系部分成员检测到相应的杂合突变，TA克隆证实 2个杂合突变位于同一等位基因。②以正常pcDNA3.1（-）/ATcDNA质粒转染细胞培养液和细胞裂解液的AT：Ag为100％，则ATM1，ATM2和ATM3（分别对应c.134G>A，c.342T>G和双突变）细胞培养上清液AT：Ag分别为25.3 ％， 35.3％，30.3 ％，而细胞裂解液AT：Ag分别为 32.3％，150.6％，200.3％。
结论：⑴AT基因外显子2区同一等位基因2个杂合点突变 c.134G>A和c.342T>G为该家系遗传性AT缺陷症的分子原因。⑵c.342T>G导致突变蛋白分泌障碍和胞内滞留，是导致本家系I型遗传性AT缺陷症的主要分子机制。