背景舌鳞状细胞癌是口腔恶性肿瘤中最常见的肿瘤,目前手术治疗仍是根治舌癌的重要环节,但手术对病人的容貌和功能都会造成较大的影响,联合化疗可弥补不足。如术前诱导化疗,可以降低肿瘤细胞生存率,从而缩小进展性舌癌的手术范围。术后化疗又可巩固手术的效果,还可防止颈部隐匿淋巴结转移造成的治疗失败,但传统化疗常因肿瘤细胞耐药性或药物毒副作用大,患者不能耐受而导致治疗失败。内皮抑素是一种内源性新血管生成抑制剂,能有效阻碍血管内皮细胞增殖和游走,还可以促使肿瘤细胞的凋亡,从而抑制肿瘤的生长和转移,具有很强的抗肿瘤特性,而且尤为重要的是,内皮抑素可特异性地针对基因稳定的内皮细胞群,治疗肿瘤具有高效性、低毒性、无耐药性等优点,而这些正是放疗和化疗的不足之处。本研究通过体外实验来探讨重组人内皮抑素对舌鳞状细胞癌细胞Tca-8113的抑制作用,为今后其临床应用提供实验依据,并为舌鳞状细胞癌的基因及药物治疗提供新的思路和理论基础。目的探讨重组人内皮抑素体外对舌鳞癌细胞Tca-8113生长的抑制效果,并阐明其作用机制,为临床应用提供实验依据。材料与方法体外培养舌鳞癌Tca-8113细胞,分为对照组和实验组;实验组细胞用含有不同浓度内皮抑素(10umol/L、20umol/L、30umol/L、40umol/L、50umol/L)的培养基进行培养,对照组细胞正常培养,至规定时间终止培养,进行各项指标检测。采用倒置显微镜观察细胞形态的变化;MTT法检测其生长抑制效应;流式细胞术分析周期变化和细胞凋亡;基底膜重建实验观察内皮抑素对细胞迁移的影响;免疫细胞化学染色观察Survivin、MMp-2基因表达的变化,统计分析应用Spss13.0软件,采用重复测量方差分析,t检验进行统计学处理。结果1.随着重组人内皮抑素的浓度升高和作用时间的增加,其对细胞的生长`、增殖抑制作用明显增强,在倒置显微镜下观察可见细胞生长增殖变慢,细胞形态收缩变圆,脱壁细胞越来越多,漂浮在培养基中。2.MTT法检测结果显示内皮抑素对细胞抑制效应有浓度,时间依赖性。3.随着重组人内皮抑素浓度的升高,细胞周期中G1期细胞比例逐渐增加,由57.67%上升到76.36%;S期细胞比例由29.07%下降到22.94%。不同浓度的内皮抑素对细胞G1期的阻止作用有明显差异性。4.随着重组人内皮抑素的浓度升高和作用时间的增加,凋亡细胞比例逐渐升高,由5.32%上升到27.63%。不同浓度之间、不同时间之间对细胞凋亡率的改变有明显差异性。5.重组人内皮抑素作用Tca-8113细胞后,细胞中凋亡抑制基因Survivin和肿瘤侵袭转移相关基因MMP-2表达下降,与对照组相比Survivin、MMP-2在胞浆的着色减轻,在胞浆的着色减轻,说明内皮抑素能抑制Tca-8113细胞中Survivin和MMP-2的表达。6.基底膜重建实验显示,重组人内皮抑素作用48小时后,浓度30umol/L其对Tca8113细胞迁移抑制率为67.94%;浓度50mol/L迁移抑制率已达95.12%,并且呈剂量浓度依赖关系。结论1.重组人内皮抑素体外能明显抑制Tca8113细胞的增殖,其抑制效应与内皮抑素浓度、作用时间有依赖关系。2.重组人内皮抑素能改变Tca8113细胞的周期分布,有明显G1期阻滞作用,并随浓度升高,作用愈明显。3.重组人内皮抑素可诱导Tca8113细胞的凋亡,并有量-效、时-效关系。4.重组人内皮抑素可下调Tca8113细胞中Survivin、MMP-2的表达。5.重组人内皮抑素可以抑制Tca8113细胞的迁移,从而抑制肿瘤的转移、生长。