异育银鲫对饲料中硒利用的研究

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本文以小规格(初始体重:3.30±0.01g)及中规格(初始体重:76.20±0.05g)异育银鲫“中科3号”(Carassius auratus gibelio var.CASⅢ)为研究对象,设计了3个生长实验来探讨饲料中添加硒以及同时添加硒和维生素E对异育银鲫的影响。通过对摄食、生长、饲料利用、形态学参数、鱼体组成、机体抗氧化能力、组织蓄积等指标的分析,评估异育银鲫对饲料中硒的需求量以及对饲料中维生素E和硒的利用情况。本论文从不同硒源角度,探讨了饲料中添加不同硒源对异育银鲫幼鱼的影响并确定了硒需求量,完善了养成中期异育银鲫对饲料中硒需求的研究数据,并且探讨了在饲料中同时添加维生素E和硒对养成中期的异育银鲫是否有交互作用。主要研究结果如下:  1、以异育银鲫幼鱼(初始均重:3.30±0.01g)为研究对象进行84d的生长实验,探讨在饲料中添加不同水平的蛋氨酸硒、酵母硒和亚硒酸钠对幼鱼的影响。以小麦蛋白粉、大豆浓缩蛋白、豆粕、菜粕和美国白鱼粉为主要蛋白源,等比例混合的鱼油和豆油为脂肪源,玉米淀粉为主要碳水化合物来源,配制成16组等蛋等脂等能(粗蛋白39.44%;粗脂肪9.93%;总能20.47kJ/g)的实用饲料。饲料中蛋氨酸硒、富硒酵母和亚硒酸钠添加水平均为0.34、0.54、0.74、0.94、1.14、1.34mg/kg饲料,三种硒源共用一个对照组,添加蛋氨酸硒时饲料硒实测值为0.34、0.65、0.94、1.26、1.54、1.95mg/kg饲料干物质,添加酵母硒时饲料硒实测值为0.34、0.68、1.09、1.69、1.89、2.26mg/kg饲料干物质,添加亚硒酸钠时饲料硒实测值为0.34、0.7、1.22、1.38、1.7、1.93mg/kg饲料干物质。结果表明:  1)摄食、生长及饲料利用:蛋氨酸硒:饲料中添加蛋氨酸硒对幼鱼摄食率(FR)和饲料效率(FE)没有产生显著性的影响(P>0.05)。幼鱼的特定生长率(SGR)随着饲料硒水平的上升有先上升后下降的趋势,在0.65mg/kg处理组达到最大值(P<0.05)。酵母硒:随着饲料硒水平的上升,幼鱼的特定生长率(SGR)呈先上升后下降的趋势,在1.09mg/kg处理组达到最大值(P<0.05),饲料中添加酵母硒对幼鱼的摄食率(FR)和饲料效率(FE)没有产生显著性的影响(P>0.05)。亚硒酸钠:饲料中添加亚硒酸钠对幼鱼的特定生长率(SGR)产生了显著性的影响,呈现先上升后下降的趋势,在1.22mg/kg处理组达到最大值(P<0.05),但摄食率(FR)和饲料效率(FE)没有受到添加硒的影响(P>0.05)。  2)形态学参数:饲料中添加蛋氨酸硒、酵母硒、亚硒酸钠对幼鱼的肥满度(CF)和肝体比(HSI)均未产生显著性的影响(P>0.05),脏体比(VSI)未受到饲料添加蛋氨酸硒和亚硒酸钠的影响(P>0.05),但添加酵母硒时,脏体比(VSI)随饲料硒水平的上升呈下降趋势(P<0.05)。  3)全鱼和背肌生化组成:饲料中添加蛋氨酸硒、酵母硒、亚硒酸钠对幼鱼全鱼的干物质、粗蛋白、粗脂肪、灰分和总能值均未产生显著性的影响(P>0.05)。饲料中添加蛋氨酸硒、酵母硒、亚硒酸钠对幼鱼背肌的干物质、粗蛋白含量均未产生显著性影响(P>0.05),背肌的粗脂肪和灰分含量未受到饲料中添加蛋氨酸硒的影响(P>0.05);添加酵母硒时,随着饲料硒水平的上升,背肌的粗脂肪和灰分含量先上升后下降,均在0.68mg/kg处达到最大值(P<0.05);添加亚硒酸钠时,背肌的灰分含量未受到影响(P>0.05),粗脂肪有先上升后下降的趋势,在1.7mg/kg处达到最大值(P>0.05)。  4)血浆、肝脏、肠道酶活性:幼鱼血浆的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)受到了饲料中添加蛋氨酸硒、酵母硒、亚硒酸钠的显著影响(P<0.05),SOD和CAT随饲料硒水平的上升均呈现先上升后下降的趋势,分别在0.94、1.09和1.22mg/kg处理组达到最大值。血浆GPx和GSH未受到饲料中添加硒的影响(P>0.05)。肝脏SOD表现趋势同血浆相似(P<0.05),肝脏GPx均呈现先上升后趋于稳定的趋势,分别在0.94、1.69和1.22mg/kg处理组达到最大值(P<0.05)。肝脏CAT和GSH未受到饲料中添加硒的影响(P>0.05)。肠道γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)未受到饲料中添加硒的影响(P>0.05)。  5)组织硒蓄积:饲料中添加蛋氨酸硒、酵母硒、亚硒酸钠对幼鱼全鱼、背肌、血浆的硒含量均产生了显著性影响,随饲料硒水平的上升呈上升趋势(P<0.05)。  6)生物利用度和需求值:以蛋氨酸硒的生物利用度为100%作对照,以血浆SOD活力为标准,得出幼鱼亚硒酸钠和酵母硒的生物利用度分别是57%和95%,折线回归分析,幼鱼对饲料中蛋氨酸硒、酵母硒、亚硒酸钠的需求量分别是0.92、1.07和1.18mg/kg饲料。以肝脏GPx活力为标准,得出幼鱼亚硒酸钠和酵母硒的生物利用度分别是53%和68%,折线回归分析,幼鱼对饲料中蛋氨酸硒、酵母硒、亚硒酸钠的需求量分别是0.94、1.05和1.17mg/kg饲料。以肝脏SOD活力为标准,得出幼鱼亚硒酸钠和酵母硒的生物利用度分别是58%和69%,折线回归分析,幼鱼对饲料中蛋氨酸硒、酵母硒、亚硒酸钠的需求量分别是0.91、1.08和1.21mg/kg饲料。以全鱼硒含量为标准,得出幼鱼亚硒酸钠和酵母硒的生物利用度分别是17%和69%。以肝脏硒含量为标准,得出幼鱼亚硒酸钠和酵母硒的生物利用度分别是53%和70%,折线回归分析,幼鱼对饲料中亚硒酸钠的需求量为1.23mg/kg饲料。以血浆硒含量为标准,得出幼鱼亚硒酸钠和酵母硒的生物利用度分别是41%和93%。  2、以养成中期异育银鲫(初始均重:76.20±0.05g)为研究对象进行84d的生长实验,探讨在饲料中添加不同水平的蛋氨酸硒对养成中期异育银鲫的影响。以不含维生素的酪蛋白、明胶和美国白鱼粉为主要蛋白源,等比例混合的鱼油和豆油为脂肪源,玉米淀粉为主要碳水化合物来源,配制成7组等蛋等脂等能(粗蛋白35.51%;粗脂肪8.01%;总能19.40kJ/g)的半精制饲料。饲料中蛋氨酸硒添加水平为0、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5、1.8mg/kg饲料,硒实测含量为0.26、0.58、0.72、1.14、1.34、1.73、2.09mg/kg饲料干物质。结果表明:  1)生长性能:饲料中添加蛋氨酸硒对养成中期鱼的特定生长率(SGR)和饲料效率(FE)未产生显著性的影响(P>0.05),饲料中添加蛋氨酸硒能显著影响摄食率(FR),在1.14mg/kg处理组有最小值(P<0.05)。随饲料硒水平的上升,鱼体蛋白沉积率(PRE)和能量沉积率(ERE)呈现先上升后下降的趋势,在1.14mg/kg处理组有最大值(P<0.05)。硒含量在2.09mg/kg处理组的肥满度显著低于0.26mg/kg对照组(P<0.05)。肝体比(HSI)、脏体比(VSI)和性腺指数(GSI)未受到饲料中添加蛋氨酸硒的影响(P>0.05)。  2)全鱼和背肌生化组成:饲料中添加蛋氨酸硒对全鱼的粗蛋白、粗脂肪、干物质和灰分含量未产生影响(P>0.05),随着饲料硒水平的上升,全鱼的总能值显著增加,2.09mg/kg硒添加组的总能值显著高于0.58mg/kg添加组(P<0.05)。背肌的干物质、粗蛋白和粗脂肪含量未受到饲料中添加硒的影响(P>0.05),灰分含量在对照组有最大值(P<0.05)。  3)血浆酶活性:饲料中添加蛋氨酸硒对养成中期异育银鲫血浆的谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)和还原型谷胱甘肽(GSH)均未产生显著性的影响(p>0.05)。血浆超氧化物歧化酶(SOD)活力在硒添加0.58mg/kg处理组有最大值,在2.09mg/kg处理组有最小值(P<0.05)。血浆丙二醛(MDA)含量随饲料硒水平上升有显著下降的趋势(P<0.05)。  4)肝脏酶活性:饲料中添加蛋氨酸硒对养成中期异育银鲫肝脏的谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)、还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)均产生了显著性的影响(P<0.05),以肝脏SOD和T-AOC活力与饲料硒水平作折线回归,得出养成中期异育银鲫的最适硒需求量分别为1.12和1.19mg/kg。  5)组织硒蓄积:随饲料硒水平的上升,全鱼、背肌、性腺和血浆的硒含量呈现显著增加的趋势(P<0.05)。以肝脏硒含量和饲料硒水平作折线回归,得出养成中期异育银鲫的最适硒需求为0.73mg/kg。  3、以养成中期异育银鲫(初始均重:75.50±0.04g)为研究对象进行64d的生长实验,探讨在饲料中添加不同水平的维生素E和硒对养成中期异育银鲫的影响。以不含维生素的酪蛋白、明胶和美国白鱼粉为主要蛋白源,等比例混合的鱼油和豆油为脂肪源,玉米淀粉为主要碳水化合物来源,配制成4组等蛋等脂等能(粗蛋白35.86%;粗脂肪8.01%;总能20.51kJ/g)的半精制饲料。按照逐级稀释法以纤维素为载体,将蛋氨酸硒和DL-α-生育酚醋酸酯分别与纤维素充分混匀,按照2×2双因素设计在饲料中同时添加4组不同浓度的维生素E与硒,饲料中维生素E和蛋氨酸硒添加水平分别为100/0.9、100/1.8、200/0.9和200/1.8mg/kg饲料,维生素E和硒实测含量分别为107.33/0.84、110.73/1.53、197.40/0.85、194.91/1.64mg/kg饲料干物质。结果表明:  1)生长性能:随着饲料中维生素E水平的上升,摄食率(FR)显著上升(P<0.05),在VE=200mg/kg,Se=1.8mg/kg处理组时达最大值,饲料中添加硒对摄食率(FR)未产生影响(P>0.05)。特定生长率(SGR)、肝体比(HSI)、脏体比(VSI)、性腺指数(GSI)和能量沉积率(ERE)在各组间无统计学上的差异(P>0.05)。随着饲料中维生素E水平的上升,蛋白沉积率(PRE)显著上升(P<0.05)。  2)全鱼和背肌生化组成:全鱼的干物质、粗脂肪和总能值无统计学上的差异(P>0.05)。全鱼粗蛋白含量随饲料维生素E水平的上升呈显著增加趋势(P<0.05)。背肌粗蛋白、粗脂肪和干物质含量无统计学上的差异(P>0.05)。  3)血浆酶活性:随着饲料中维生素E水平的上升,血浆的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)和丙二醛(MDA)含量有下降趋势(P>0.05),在VE=200mg/kg,Se=1.Smg/kg处理组时有最小值。血浆过氧化氢酶(CAT)和总抗氧化能力(T-AOC)在VE=200mg/kg,Se=1.8mg/kg处理组时有最大值(P>0.05)。血浆还原型谷胱甘肽(GSH)含量在VE=100mg/kg,Se=0.9mg/kg处理组时有最大值(P>0.05)。  4)肝脏酶活性:随着饲料中维生素E水平的上升,肝脏的SOD活力有增加趋势(P>0.05),在VE=200mg/kg,Se=0.9mg/kg处理组时有最大值。肝脏的GSH-Px和T-AOC在VE=200mg/kg,Se=1.8mg/kg处理组时有最大值(P>0.05)。随着饲料中硒水平的上升,肝脏的CAT和MDA有上升趋势(P>0.05),在VE=200mg/kg,Se=1.8mg/kg处理组时有最小值。  5)组织硒蓄积:肝脏和背肌维生素E含量随饲料维生素E水平的上升呈显著增加趋势(P<0.05),在VE=200mg/kg,Se=1.8mg/kg处理组时有最大值。随着饲料中硒水平的上升,肝脏和背肌的硒含量也显著增加(P<0.05),在VE=100mg/kg,Se=1.8mg/kg处理组时有最大值。饲料中添加维生素E和硒对全鱼维生素E含量没有显著性影响(P>0.05)。随着饲料中硒水平的上升,全鱼的硒含量显著增加(P<0.05),在VE=200mg/kg,Se=1.8mg/kg处理组时有最大值。饲料中同时添加维生素E和硒对血浆硒含量有显著交互作用(P<0.05)。  饲料中添加一定量的硒能增加异育银鲫的摄食,促进鱼体的生长,有效地提高机体的抗氧化能力,增加组织的贮存量,综合以上结果,异育银鲫对饲料中硒的利用能力依次是:蛋氨酸硒(100%)>酵母硒(68%-95%)>亚硒酸钠(17%-58%)。饲料中同时添加维生素E和硒对异育银鲫没有交互作用。
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