苦参碱对S180肉瘤小鼠肿瘤血管形成抑制作用的研究

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目的:通过建S180肉瘤小鼠肿瘤模型观察中药苦参碱生物提取制剂对S180肉瘤小鼠实体瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达及微血管密度(MVD)的影响,探讨苦参碱抗肿瘤的作用机制。方法:40只Balb/c小鼠接种S180肉瘤细胞后,随机分成4组,即单纯肿瘤组(对照组),苦参碱组,环磷酰胺组,苦参碱组+环磷酰胺组,连续l0日施加处理因素,停药后次日断颈处死小鼠。采用观察小鼠一般状态变化情况,计算抑瘤率,光镜观察肿瘤组织的血管增生情况,电镜观察血管内皮细胞变异情况,免疫组化法检测瘤体间质内微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)表达。结果:1.各组小鼠一般状态:对照组小鼠毛色灰暗,精神状态差,运动迟缓,饮食量小;环磷酰胺组小鼠毛色稍暗,精神萎靡,运动迟缓,饮食量较小;苦参碱组小鼠皮毛较光滑,精神状态良好,运动略迟缓;苦参碱+环磷酰胺组皮毛光滑,精神状态良好,运动灵活,饮食量较环磷酰胺组、苦参碱组大。2.各用药组小鼠体重对S180肉瘤小鼠肿瘤均有不同程度的抑制作用:苦参碱组为34.7%;环磷酰胺组为30.4%;以苦参碱+环磷酰胺组抑瘤率最高,达40.8%。3.光镜见对照组肿瘤间质中新生的毛细血管较环磷酰胺组、苦参碱组及苦参碱+环磷酰胺组密集,平均每个高倍镜视野(400倍)下可见到8—12个毛细血管,苦参碱+环磷酰胺组肿瘤间质中血管数目明显低于对照组,平均每个高倍镜视野(400倍)下可见到5—8个毛细血管。4.电镜下可见。5.免疫组化显示,环磷酰胺组、苦参碱组、苦参碱+环磷酰胺组VEGF阳性表达、MVD均降低(p<0.05),苦参碱+环磷酰胺组降低最明显;各用药组血管内皮生长因子表达降低者,微血管密度明显降低,结果显示血管内皮生长因子表达与微血管密度呈正相关。结论:1.苦参碱具有提高S180肉瘤小鼠生存质量的作用;2.苦参碱具有抑制S180肉瘤小鼠肿瘤细胞生长的作用;3.苦参碱对S180肉瘤小鼠血管形成有明显的抑制作用;4.苦参碱可降低S180肉瘤小鼠VEGF蛋白表达;5.苦参碱可降低S180肉瘤小鼠MVD蛋白表达;6.苦参碱提高S180肉瘤小鼠生存质量、抑制肿瘤血管生成的作用是通过减少肿瘤间质中微血管密度、降低VEGF蛋白表达而实现的;7.苦参碱与抗肿瘤药物环磷酰胺合用具有减毒增效的作用。
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