树参蜜的理化性质、化学组成与抗氧化活性研究

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树参[Dendropanax dentiger(Harms)Merr.],属于五加科(Araliaceae)树参属(Dendropanax),其根、茎、叶均可入药,是我国传统的民间药材,用于治疗多种疾病,主要分布于我国的江西省、浙江省、安徽省、湖南省和湖北省等地区,在江西省多地山区能形成较为单一的植物群落,使得较高纯度的树参蜜的获取成为可能。蜂蜜是由蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露酿造而成的天然甜味物质,含有丰富的营养成分,具有抗氧化、抗菌、抗肿瘤、抗炎、抗病毒和保肝等多种功能活性,并具有较高的食用、药用和保健等价值。不同的蜂蜜具有不同的颜色、风味、化学组成和生物活性,很大程度上取决于其植物和地理来源,其中蜜源为药用植物的蜂蜜对人体健康大有裨益,但目前没有关于树参蜜的研究报道。本研究以采自江西省各地的树参蜜为实验材料,系统地研究了其理化指标,建立了高效液相-固相萃取法(HPLC-SPE)检测树参蜜的酚类化合物,并进一步与超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)相结合,对其化学组成进行全面的分析,通过体外与体内相结合对其抗氧化活性进行了研究。主要的研究结果如下:1.参照国家标准及国际蜂蜜委员会规定的方法测定了树参蜜的常规理化指标,包括含水量、酸度、p H值、羟甲基糠醛、淀粉酶活性、电导率、糖组成及含量、色度、总酚及总黄酮含量。结果表明,树参蜜的各项理化指标符合国家标准,并具有羟甲基糠醛(1.56±0.68mg/kg)、淀粉酶活性(3.16±0.79mL/(g.h))及蔗糖(0.59±0.23%)含量较低,水分(22.29±1.68%)、总酚(62.89±10.31mg GAE/100g)和总黄酮(40.86±4.32mg RE/100g)含量较高等特点,颜色为琥珀至深琥珀色。2.HPLC-SPE方法学研究表明,酚类化合物的平均回收率为99.91±2.11%,方法可靠、适用于树参蜜的检测。采用此法从树参蜜中检测到11种酚酸和5种黄酮类化合物。其中原儿茶酸和绿原酸2种酚酸类化合物,及芦丁、木犀草素和槲皮素3种黄酮类化合物在所有样品中均检测到,其中芦丁(114.25-2329.65μg/100g)的含量最高,其次是原儿茶酸(57.93-1158.85μg/100g)和绿原酸(45.80-193.54μg/100g),木犀草素和槲皮素的含量较低,分别为48.19-127.64μg/100g、25.24-119.03μg/100g。通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)软件构建了树参蜜的HPLC指纹图谱,并确定了其中5个特征峰,分别为原儿茶酸、绿原酸、芦丁、木犀草素和槲皮素。3.通过UPLC-Q/TOF-MS对树参蜜的化学成分进行鉴定及分析,在正离子和负离子模式下共鉴定出190种化合物,包括酚酸类、黄酮类、有机酸、生物碱、脂质、糖类、氨基酸及其衍生物、核苷酸及其衍生物、木脂素类、香豆素类、维生素和萜类。其中有109种物质在所有样品中均检测出,这些成分的响应占总成分的85.69%,主要为酚酸类、黄酮类、有机酸和生物碱。结合标准品对其中的23种物质进行了定量分析,发现高含量的脱落酸(671.87-1492.83μg/100g)、原儿茶酸(19.44-326.61μg/100g)和对羟基苯甲酸(36.47-104.29μg/100g)在所有样品中均检测到,可作为树参蜜的潜在标记物。4.采用DPPH法、ABTS法和FRAP法评估了树参蜜的体外抗氧化活性,研究表明树参蜜具有一定的抗氧化能力,对DPPH+自由基清除能力的IC50平均值为71.86±12.41mg/m L,对ABTS+自由基清除能力的当量为56.62±11.63μmol Trolox/100g,对Fe3+还原能力的当量为58.71±8.38μmol FeSO4·7H2O/100g。小鼠体内抗氧化实验结果表明,长期摄入树参蜜的小鼠体重虽略有增加,但肝重无明显增长,肝脏系数下降了5.13%,肝脏的氧化损伤受到了抑制。HE和油红染色研究结果表明,肝组织未出现明显的病理变化及氧化损伤。树参蜜能够增强小鼠肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,分别升高了38.57%和33.00%,且具有显著性差异(p<0.05)。说明树参蜜具有较强的预防氧化应激和抑制脂质过氧化作用。综上所述,树参蜜的各项理化指标符合国家标准,具有羟甲基糠醛和蔗糖含量低,总酚和总黄酮含量高,颜色较深等优质特征;其富含多种活性成分,包括酚酸类、黄酮类、有机酸和生物碱等,脱落酸、原儿茶酸和对羟基苯甲酸的含量尤其丰富,可作为树参蜜的潜在标记物;并具有较强的体外和体内抗氧化活性,能有效抑制小鼠肝脏脂质过氧化。本研究为树参蜜的研究提供了基础数据,也能为蜂蜜的质量控制、品质评价、真实性鉴定和蜂蜜植物溯源提供重要的理论依据,有助于提高人们对树参蜜的健康效益和商业价值的认识。
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