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目的:从细胞层面上研究MIF通过ERK信号途径促进肝癌细胞增殖的分子机制,为进一步研发以MIF为靶点治疗HCC的药物研发建立理论基础。方法:首先,将MIF(50 ng/ml,100 ng/ml,200 ng/ml)加入肝癌细胞HepG2作为实验组,MIF(50 ng/ml,100 ng/ml,200 ng/ml)加入肝硬化细胞QSG-7701和正常肝细胞L-02中作为对照组,将MIF拮抗剂ISO-1(50μM)加入肝癌细胞HepG2中作为阴性对照组,各组细胞设一组空白对照组,只加入培养基。通过MTT法检测HepG2细胞存活率来筛选MIF最佳浓度。其次,培养各组细胞24 h后收集细胞,用Real time-PCR检测各组细胞ERK基因表达,用Western-blot法检测各组细胞ERK蛋白表达及其磷酸化水平(p-ERK)。结果:1.MIF具有明显促进细胞增殖作用,在HepG2作用最为显著;2.MTT法可得出在同一时间,随着浓度升高MIF促增殖作用逐渐增强,浓度为200ng/ml时细胞增殖最显著,在HepG2作用更为显著;3.Real time-PCR检测结果可见与对照组相比,ERK基因表达量是上调的,在MIF浓度最大时(200 ng/ml)ERK基因的表达与低浓度组及对照组相比增多最为显著(P<0.05),HepG2与QSG-7701、L-02比较差异均有统计学意义(P<0.05),QSG-7701与L-02比较差异无统计学意义(P>0.05)。Western-blot结果提示不同浓度MIF组ERK蛋白表达无明显差异,而p-ERK的表达是上调的,其中MIF浓度为200 ng/ml时p-ERK蛋白表达较低浓度组及对照组明显增多(P<0.05),HepG2与QSG-7701、L-02比较差异均有统计学意义(P<0.05),QSG-7701与L-02比较差异无统计学意义(P>0.05);4.ISO-1通过抑制MIF表达,下调ERK信号通路蛋白表达,抑制HepG2细胞增殖,Real time-PCR检测显示与MIF组相比,ERK基因表达量下调差异有统计学意义(P<0.05)。Western-blot结果提示ISO-1组与MIF组及对照组比较,ERK蛋白表达量无明显差异(P>0.05),而p-ERK蛋白表达下调并差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MIF能够促进HepG2细胞增殖,并且是通过ERK信号通路发生磷酸化促进肝癌细胞增殖的。