阿司匹林抵抗、血小板膜糖蛋白Ⅱb HPA-3基因多态性与脑梗死的相关性研究

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研究目的:本研究采用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测所有研究对象的血小板聚集率水平,分别以二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、花生四烯酸(arachidonic acid,AA)作为诱导剂,筛选出阿司匹林抵抗(aspirin resistance,AR)患者,探讨AR与脑梗死的相关性;采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性方法检测所有研究对象的血小板膜糖蛋白(glycoprotein,GP)Ⅱb HPA-3基因分型及等位基因频率分布,分析GPⅡb HPA-3基因多态性与脑梗死的相关性;224例急性脑梗死患者在出院第6个月时电话随访,分析患者转归不良的危险因素。本研究主要探讨AR、GPⅡb HPA-3基因多态性与脑梗死发病、复发及转归的相关性。方法:收集224例急性脑梗死患者和98例与之性别、年龄相匹配的体检者,利用FCM检测所有研究对象入院时的血小板聚集率水平,脑梗死组患者每天口服阿司匹林100mg,7天后复测患者的血小板聚集率水平,筛选出AR患者,以探讨AR与脑梗死发病、复发及其转归的相关性。以ADP为诱导剂血小板聚集率≥39.27%,以AA为诱导剂血小板聚集率≥34.27%,同时符合该两项指标者称为AR,仅满足其中一项者称为阿司匹林半抵抗(aspirin semi-resistance,ASR),两项均不符合者称为阿司匹林敏感((aspirin sensitivity,AS)。采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性方法检测所有研究对象GPⅡb HPA-3基因型,分析各基因型和等位基因频率分布与脑梗死发病、复发及其转归的相关性。根据TOAST(Trial of Org 10172 in Acute Stroke Treatment)病因学分型标准将脑梗死患者分为大动脉粥样硬化型、小动脉闭塞型、心源性栓塞型、其他明确病因型和不明原因型,探讨TOAST亚型与脑梗死转归的相关性。脑梗死患者每天口服阿司匹林100mg抗血小板治疗,在患者出院第6个月时电话随访。根据随访结果,将患者分为转归不良组和转归良好组。转归不良定义:改良的Rankin量表>2分。结果:1.224例急性脑梗死患者中AR 34例,AR发生率为15.18%,ASR 65例,ASR发生率为29.02%,AR+ASR 99例,AR+ASR发生率为44.20%;162例脑梗死首发患者中AR 17例,AR发生率10.49%,ASR 40例,ASR发生率为24.69%,AR+ASR 57例,AR+ASR发生率为35.18%;62例脑梗死复发患者中AR 17例,AR发生率27.42%,ASR 25例,ASR发生率为40.32%,AR+ASR 42例,AR+ASR发生率为67.74%。脑梗死组亚组中复发组AR和ASR发生率明显高于首发组(c2AR=9.977,PAR=0.002;c2ASR=5.319,PASR=0.021)。2.脑梗死组高血压病、糖尿病、收缩压、低密度脂蛋白、bb基因型和b等位基因频率明显高于对照组(P<0.05)。Logistic回归分析显示,高血压病、收缩压、bb基因型、AR和低密度脂蛋白可能是脑梗死发病的独立危险因素。3.脑梗死亚组中复发组患者入院时美国国立卫生院神经功能缺损评分(national institutes of health stroke scale,NIHSS)、糖尿病、bb基因型和b等位基因频率明显高于首发组(P<0.05)。Logistic回归分析显示,糖尿病、AR和bb基因型可能是脑梗死复发的独立危险因素。4.脑梗死亚组中AR组bb基因型频率64.71%,b等位基因频率79.41%;ASR组bb基因型频率38.46%,b等位基因频率61.54%;AS组bb基因型频率43.20%,b等位基因频率60.80%。AR组bb基因型和b等位基因频率明显高于ASR和AS组(cbb2=7.180,Pbb=0.028;c2b=8.422,Pb=0.004)。5.脑梗死亚组中转归不良组心房颤动和大动脉粥样硬化性脑梗死、入院时NIHSS评分、AR、bb基因型、b等位基因频率明显高于转归良好组(P<0.05)。Logistic回归分析显示,bb基因型、AR和大动脉粥样硬化性脑梗死可能是脑梗死患者转归不良的独立危险因素。结论:AR、GPⅡb HPA-3 bb基因型可能是脑梗死发病、复发及转归不良的独立危险因素,从而为脑梗死二级预防的个体化抗血小板治疗提供理论依据。
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