苯氧羧酸类残留的毛细管电泳分析与分子印迹固相萃取研究

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苯氧羧酸类除草剂是在世界范围内广泛使用的一类商业除草剂,其代谢产物降解缓慢,一些品种会干扰人类和动物的内分泌。它们可通过水和土壤生态系统转移进入农作物、水产品等中,进而威胁人类健康。欧盟、美国、日本、中国等国家都规定了这类除草剂在食品中的残留标准。因此,建立灵敏可靠的检测方法对于监测这类除草剂在食品中的残留情况是十分必要的。食品样品基质成分复杂,提高了痕量除草剂残留检测的难度,如何去除复杂基质中的杂质干扰是实现痕量残留分析的关键。本论文以2,4-滴(2,4-D)、4-氯苯氧异丁酸、毒莠定、二氯吡啶酸为分析物,进行了其痕量残留检测和前处理方法的研究,具体内容如下:建立了毛细管电泳(CE)在线富集法检测谷类食品中4种苯氧羧酸类除草剂的快速、高效、环保的新方法。研究了缓冲液pH、磷酸盐浓度、十二烷基硫酸钠(SDS)浓度、分离电压、进样时间、样品区带盐浓度、样品区带pH以及富集电压对分离和富集效果的影响。优化的缓冲液组成为20mmol/L磷酸盐,60mmol/L SDS,pH为7.5;分离电压为20kV;分离温度为25℃;检测波长为220nm;样品溶液pH为7.5,磷酸盐浓度为20mmol/L;进样条件为3.5kPa×200s;富集电压为-20kV。在最优条件下,4种苯氧羧酸类的富集倍数达到510~620,检出限(LOD)为0.20~0.38μg/kg,日内精密度为0.9~1.3%,日间精密度为1.8~2.4%;在5~50μg/kg加标水平下,4种除草剂在谷类食品中的回收率为80.6~96.7%,RSD为2.1~5.0%。本方法可满足多国规定的苯氧羧酸类除草剂最大允许残留限量的要求,可用于谷类食品中苯氧羧酸类残留检测。建立了沉淀聚合制备4-氯苯氧异丁酸分子印迹聚合物(MIP)微球的方法。优化了功能单体、有机溶剂、交联剂用量。最佳制备条件为n(4-氯苯氧异丁酸):n(甲基丙烯酸):n(乙二醇二甲基丙烯酸酯)=1:4:20;偶氮二异丁腈用量为25mg,乙腈用量为30mL;聚合反应温度为60℃,反应时间17h。所得分子印迹微球对模板分子吸附性能良好,印迹诱导结合(IPB)值达到117.26%。印迹聚合物对模板分子有两类不同性质的亲和吸附位点,高亲和力结合位点的平衡常数和最大表观吸附量分别为0.923mmol/L和29.063μmol/g,而低亲和力结合位点的分别为10.059mmol/L和146.814μmol/g。所制备的MIP微球对4种苯氧羧酸类除草剂都表现出较好的吸附性能,且重复使用性好。建立了以4-氯苯氧异丁酸分子印迹微球为填料的固相萃取(SPE)柱应用于大米和燕麦片样品中苯氧羧酸类除草剂净化与富集的使用方法,并将其应用于毛细管电泳检测中。使用条件如下:5mL乙腈作为上样溶剂,上样流速为0.6mL/min;淋洗剂为5mL甲醇-乙腈(25:75,V/V);洗脱剂为6mL甲醇-乙酸(90:10,V/V)。结果表明,经分子印迹固相萃取(MISPE)柱处理后,在0.05~0.2mg/kg加标水平下,4种苯氧羧酸类除草剂的回收率为81.9~97.7%,经C18柱处理后的回收率为80.3~91.7%,说明MISPE柱净化效果优于C18柱,可用于谷类食品中的净化和离线富集。
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