【摘 要】
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本研究拟通过化学萃取获得脱细胞的大鼠同种异体神经支架,复合上编码胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic growth factor, GDNF)和血管内皮生长
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本研究拟通过化学萃取获得脱细胞的大鼠同种异体神经支架,复合上编码胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic growth factor, GDNF)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)基因的真核表达质粒,构建一种具有生物活性的人工神经复合体并研究其在修复大鼠坐骨神经缺损中的作用,为探索自体神经移植的替代方法提供理论和实验依据。第一部分大鼠脱细胞同种异体神经支架的构建目的:构建大鼠脱细胞同种异体神经支架。方法:健康雌性SD大鼠50只,体重在450g-500g之间作为供体。采用Triton-X100和脱氧胆酸钠通过低渗-脱细胞的组织工程学方法来处理新鲜大鼠坐骨神经。钴-60γ射线辐照消毒灭菌后,通过大体观察、光镜观察、扫描电镜观察评价其组织形态。4只Wistar大鼠作为受体行体内桥接实验,术后3天,4周取支架作石蜡切片,HE染色;3只Wistar大鼠作为受体行背部肌肉包埋实验,术后1周取支架作石蜡切片,HE染色;评价细胞相容性和组织相容性。结果:经过化学萃取后支架呈半透明状,较新鲜神经略有收缩。光镜观察、扫描电镜观察均未发现明显的细胞成分残留,仅剩下较完整的基底膜管道。肌肉包埋实验后1周支架周围有轻微的炎症反应,周围肌肉无明显坏死。体内桥接实验发现术后3天雪旺细胞即可长入
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