【摘 要】
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目的:采用Western Blot、RT-PCR等分子生物学技术,检测在Ca2+拮抗剂A23187诱导下,人肺腺癌细胞系SPCA-1中糖调节蛋白78(GRP78)的表达水平,并分析其表达在肺腺癌细胞对顺铂耐
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目的:采用Western Blot、RT-PCR等分子生物学技术,检测在Ca2+拮抗剂A23187诱导下,人肺腺癌细胞系SPCA-1中糖调节蛋白78(GRP78)的表达水平,并分析其表达在肺腺癌细胞对顺铂耐药中的作用。方法:根据诱导剂A23187(0、1、2、4、6μM)的浓度进行细胞分组。采用RT -PCR、Western杂交检测各组细胞中GRP78在核酸和蛋白水平的表达,同时利用MTT法(四甲基偶氮唑盐法)测定细胞在顺铂作用下的生存率。根据蛋白的表达情况及细胞的生存率,阐明GRP78在肺癌对顺铂耐药中的作用。结果: A23187可以明显诱导人肺腺癌细胞SPCA-1中GRP78在核酸和蛋白水平的表达,且其表达水平与A23187具有一定的浓度依赖性。MTT法显示:A23187浓度在1μM时,细胞生存率明显高于对照组,但随浓度增加(2,4,6μM)表现为细胞生存率较对照组明显降低,且生存率降低的程度与A23187浓度相关,SPCA-1细胞生存率与GRP78的表达水平相关。结论:在人肺腺癌细胞SPCA-1中,Ca2+拮抗剂A23187可以诱导GRP78蛋白和核酸水平的表达,其表达与肺癌细胞生存率成负相关,表明GRP78的表达与肺腺癌细胞对顺铂的耐药性有关。
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