【摘 要】
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荔枝是我国南方具有重要营养和经济价值的特色果树,严重的荔枝幼果脱落是荔枝产业亟需解决的关键问题之一。目前在荔枝上关于幼果脱落的分子机制研究较少。NAC是一类植物特有的转录因子,在果实成熟、叶片衰老、果荚开裂等过程中发挥重要作用。本课题组前期通过RNA-seq技术共挖掘了2730个与果实脱落相关的基因,其中包括了12条NAC转录因子。然而,NAC转录因子是否参与了荔枝果实脱落还需进一步的探讨。因此,
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荔枝是我国南方具有重要营养和经济价值的特色果树,严重的荔枝幼果脱落是荔枝产业亟需解决的关键问题之一。目前在荔枝上关于幼果脱落的分子机制研究较少。NAC是一类植物特有的转录因子,在果实成熟、叶片衰老、果荚开裂等过程中发挥重要作用。本课题组前期通过RNA-seq技术共挖掘了2730个与果实脱落相关的基因,其中包括了12条NAC转录因子。然而,NAC转录因子是否参与了荔枝果实脱落还需进一步的探讨。因此,本研究拟通过生物信息学分析、q RT-PCR、启动子活性分析以及异源转基因等技术,挖掘潜在的调控荔枝幼果脱落的Lc NACs转录因子。本文主要研究结果如下:（1）利用生物信息学分析从荔枝全基因组中筛选得到97个荔枝NAC转录因子家族成员,命名为Lc NAC01-Lc NAC97,通过系统发育进化分析将其划分为21个亚家族。（2）乙烯利（ETH）和环剥去叶（GPD）处理可显著促进荔枝幼果脱落。在此过程中,Lc NAC05/13/38/40/65基因在果柄离区中的表达随荔枝幼果脱落的加剧而明显上调,Lc NAC10则显著下调。（3）在候选的6个荔枝幼果脱落相关Lc NACs基因中,Lc NAC05/10/13/40/65蛋白定位于细胞核且具有转录激活活性,Lc NAC38则定位在细胞核核细胞质上且不具有转录激活活性。（4）对候选的6个Lc NACs基因启动子进行了克隆,序列分析发现6个Lc NACs基因启动子均含有响应乙烯的元件,烟草瞬时表达分析结果显示仅有Lc NAC13/40启动子受乙烯诱导而活性增强。将Lc NACs启动子融合GUS基因异源转入野生型拟南芥中,经GUS组织化学染色分析,结果表明Lc NAC13/40基因启动子能够驱动下游GUS基因在拟南芥花器官离区、茎生叶脱落离区、种子脱落部位、果荚开裂区等多个器官脱落/开裂部位进行表达。（5）将候选的6个Lc NACs基因异源转入野生型拟南芥中,并对这些转基因拟南芥株系的花器官脱落进程进行了分析,结果表明与野生型拟南芥相比,仅有Lc NAC40基因能够明显促进花器官的提前脱落,且过表达Lc NAC40基因拟南芥株系花器官离区的BCECF荧光信号的出现发生了提前。推测Lc NAC40可能参与了荔枝落果。
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恩诺沙星属化学合成的第三代喹诺酮类抗菌药,对革兰氏阳性菌、阴性菌及支原体的生长具有良好的抑制作用,被广泛应用于畜禽胃肠道、呼吸道等细菌性疾病的预防和治疗。本试验利用恩诺沙星和桉叶油的药用特点,筛选合适的辅料包括乳化剂、助乳化剂、p H调节剂和抗氧化剂,研制出了一种可采用吸入方式给药的禽用恩诺沙星纳米乳,对该制剂进行了质量评价及稳定性考察,同时开展了人工诱发感染试验,对其进行药效学评估,为临床合理用
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