目的儿童特发性血小板减少性紫癜（Idiopathic trombocytopenic purpura,ITP）是一种免疫性综合病征,是儿科常见的出血性疾病。特点是血循环中存在抗血小板抗体,使血小板破坏过多,引起紫癜;而骨髓中巨核细胞正常或增多,幼稚化。急性型病前多有病毒感染史,以上呼吸道感染、风疹、麻疹、水痘居多;也可在疫苗接种后。感染与紫癜间的潜伏期多在1-3周内。主要为皮肤、粘膜出血,往往较严重,皮肤出血呈大小不等的瘀点,分布不均,以四肢为多。粘膜出血有鼻衄、牙龈出血、口腔舌粘膜血泡。常有消化道、泌尿道出血,眼结合膜下出血,少数视网膜出血。脊髓或颅内出血常见,可引起下肢麻痹或颅内高压表现,可危及生命。HPV-B19病毒是单链DNA病毒,属微小病毒科,感染B19后会产生特异性抗体,是儿科常见的出疹性疾病—传染性红斑（又称第五病,Erythema infection,EI）的病因。在免疫缺损病人中可造成持续性感染。如果妊娠期受B19病毒感染,可致流产、死胎和胎儿水肿症的发生。此外它还与多种造血系统异常表现如中性粒细胞减少症、血小板减少症有关。有相关报道显示典型ITP病人中外周血或骨髓中B19 DNA阳性率,及抗B19 IgM、IgG阳性率明显高于对照组,提示儿童特发性血小板减少性紫癜可能与B19病毒感染有关。本研究通过对50例特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者（研究组）及48例健康儿（对照组）采用PCR法行人类微小病毒B19（HPV-B19）DNA检测及相关临床指标的检测,研究HPV-B19感染与ITP的发病关系,以期为ITP的发病机制提供新的依据。资料与方法一、病例选择选择2002年6月～2005年12月我院ITP患儿50例,其中男29例、女21例,年龄2岁4个月～12.5岁,急性型31例、慢性型19例。所有患儿均0符合中华医学会儿科学分会血液学组制定的ITP诊断标准。对照组为48例在儿科门诊体检的健康儿,其中男28例、女20例,年龄2.5岁～13岁。二、方法1.HPV-B₁₉ IgM、IgG检测:用ELISA法检测患儿血清HPV-B₁₉ IgM、IgG。2.HPV-B₁₉ DNA检测:清晨采集患儿空腹静脉血5ml于抗凝管内,PCR检测白细胞HPV-B₁₉ DNA。3.T细胞亚群检测:采用直接免疫荧光染色法,经流式细胞仪检测检测患儿外周血T细胞亚群。4.外周血检测:采外周血后用全自动血细胞分析仪测定血细胞计数、血小板数、血小板压积、血小板平均体积、血小板平均分布宽度。5.巨核细胞计数及分类计数:骨髓穿刺后涂片,瑞氏染色后计数、分类结果1.HPV-B19 IgM、IgG检测:健康对照组HPV-B19 IgM阳性有1例、IgG阳性有12例;慢性ITP组IgM阳性有5例、IgG阳性有12例;急性ITP组IgM阳性有16例、IgG阳性有26例。急性ITP组和慢性ITP组与健康对照组相比HPV-B19 IgM、IgG阳性率均有明显差异（均P＜0.05）。2.HPV-B19 DNA检测:HPV-B19 DNA阳性在健康对照组、急性ITP组和慢性ITP组的阳性率分别为4.2%、38.7%和10.5%,急性ITP组和慢性ITP组与健康对照组相比有显著性差异（P＜0.05）,急性ITP组和慢性ITP组相比有显著性差异（P＜0.05）。3.T细胞亚群检测:健康对照组、急性ITP组和慢性ITP组血T细胞亚群检测显示急性、慢性ITP组与健康对照组相比CD₄⁺细胞减少,CD₄⁺/CD₈⁺比值下降（P＜0.01）,且急性ITP组与慢性ITP组比较,急性ITP组CD₄⁺细胞减少,CD₄⁺/CD₈⁺比值下降更为明显（P＜0.05）。4.外周血检测:全自动血细胞分析测定显示急性ITP组和慢性ITP组与健康对照组相比,外周血血小板数明显降低（P＜0.01）,而血小板平均体积显著增大（P＜0.01）,且急性ITP组中HPV-B₁₉ DNA阳性与急性ITP组中HPV-B₁₉DNA阴性比较外周血血小板数明显降低（P＜0.05）,而血小板平均体积,急性ITP组中HPV-B₁₉DNA阳性与急性ITP组中HPV-B₁₉ DNA阴性比较显著增大（P＜0.01）。5.巨核细胞计数及分类计数:骨髓穿刺后涂片,瑞氏染色后计数、分类显示急性ITP组中HPV-B19 DNA阳性患者巨核细胞的总数、急性ITP组中HPV-B19DNA阴性患者巨核细胞总数和慢性ITP组与健康对照组相比,巨核细胞的总数均明显升高（均P＜0.01）;急性ITP组中HPV-B19 DNA阳性患者产板巨核细胞比例、急性ITP组中HPV-B19 DNA阴性患者产板巨核细胞比例和慢性ITP组与健康对照组相比,产板巨核细胞比例明显降低（均P＜0.01）;且急性ITP组中HPV-B₁₉ DNA阳性与急性ITP组中HPV-B₁₉ DNA阴性比较巨核细胞的总数无明显差异（P＞0.05）,但是产板巨核细胞比例明显降低（P＜0.05）。结论1.HPV-B₁₉感染及其引起的机体免疫功能紊乱可能与ITP尤其急性型ITP的发病密切相关;2.HPV-B₁₉活动感染可使血小板数量进一步减少,而加重ITP的临床症状,可能是ITP发病的重要原因之一。