发酵法生产γ-亚麻酸油脂工艺研究

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γ-亚麻酸(GLA)属于十八碳三烯酸,是人体必需脂肪酸。目前市面上的γ-亚麻酸大部分来源于植物提取,因γ-亚麻酸来源及产量的局限性,导致其生产成本居高不下。因此低成本生产γ-亚麻酸成为国内外研究重点及热点。本文在现有的实验室摇床研究结果基础上,重点展开菌株FR3在10L发酵罐和5t发酵罐中的发酵工艺、菌丝体油脂亚临界萃取工艺与GLA的理化性质及油脂抗氧化等研究。旨在利用廉价的土豆打浆液培养刺孢小克银汉霉(Cunninghamella echinulata,编号FR3)低成本获取GLA。对菌株FR3在10L发酵罐中的发酵工艺参数进行了研究,研究结果为:搅拌转速为100r/min,发酵pH为5.0,培养温度为25℃,通气量为500L/h;从第三天开始连续补加30%葡萄糖溶液,使第七天发酵结束时总糖量达到5%。通过上述参数控制,最终获得菌丝体生物量为34.64g/L,油脂产量为10.86g/L,GLA产量为1270mg/L,较优化前分别提高了25.10%、35.54%、71.16%。进一步在5t发酵罐中进行放大工艺研究,研究结果为:最适通气量为180m3/h;控制50L种子罐和500L扩增罐的初始pH为5.0;利用液体过滤器从开始连续补加20%葡萄糖溶液,使第七天发酵结束时总糖量达到5%。通过上述5t发酵罐发酵参数控制,最终获得菌丝体生物量为32.54g/L,油脂产量为10.45g/L,GLA产量为1236mg/L,基本达到了10L发酵罐的发酵水平。对从发酵罐中收获的菌丝体进行了丁烷亚临界萃取工艺研究,获得了最佳提取工艺:(1)热压预处理工艺:热压温度70℃,菌丝体含水率8.36%,油饼厚度控制2mm;(2)亚临界萃取工艺:萃取温度44℃,料液比0.075,萃取时间11.3h。在上述提取条件下,GLA提取得率达到32.56mg/g干菌丝体。对获得的GLA进行稳定性及抗氧化实验,结果表明:高温、紫外线和光照对油脂中GLA均具有一定的破坏作用;天然抗氧化剂VC和迷迭香提取物对油脂的氧化反应有一定的抑制作用,并发现在国家标准规定用量范围内,抗氧化剂用量越大,其抗氧化效果越好。通过本文研究,在反应器水平上实现了廉价原料的微生物发酵生产GLA,为GLA的产业化生产提供了重要的技术工艺参数。
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