【摘 要】
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活性蛋白质是构成生命的基础物质,它的特异性检测一直是化学生物学的重要研究内容。荧光探针具有选择性好,灵敏度高,所需样品量小,可实现无损伤检测等优点而得到广泛应用。四苯乙稀（TPE）作为新型荧光团具有“聚集诱导发光”效应（aggregation-induced emission,AIE）,能够很好的解决传统的荧光分子因聚集引发猝灭（aggregation-caused quenching,ACQ）的
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活性蛋白质是构成生命的基础物质,它的特异性检测一直是化学生物学的重要研究内容。荧光探针具有选择性好,灵敏度高,所需样品量小,可实现无损伤检测等优点而得到广泛应用。四苯乙稀（TPE）作为新型荧光团具有“聚集诱导发光”效应（aggregation-induced emission,AIE）,能够很好的解决传统的荧光分子因聚集引发猝灭（aggregation-caused quenching,ACQ）的难题,从而有效地提高检测的灵敏度。本论文利用具有AIE性质的TPE类荧光物质设计合成了两类荧光探针。本论文包含以下两方面的内容:1、以吡啶盐为单胺氧化酶（MAO）的结合基团,采用不同的吡啶盐类型与TPE相连设计合成了六个水溶性荧光探针。结果表明连接甲基吡啶盐结构的两个探针能够成功检测（MAO）活性,并且反式结构探针t-TPEM对MAO-A具有良好的选择性,它与MAO-A反应后的荧光强度是其他酶的21倍。作为抑制剂t-TPEM对MAO-A的IC50和Ki值分别是51.9μM和17.1μM,证明其MAO-A具有很好的抑制活性。细胞成像图显示探针能用于检测活细胞中MAO活性。2、利用谷氨酸的水溶性以及酰胺反应改变电子推拉性质设计合成了几类以谷氨酸残基为识别基团的TPE型谷氨酸转移酶（GGT）“OFF-ON”探针。检测结果表明c-TPE2LG、t-TPE2LG能很好地对GGT进行检测,顺式结构的c-TPE2LG与GGT反应后的荧光强度是反式结构t-TPE2LG的3.4倍。对其他酶的检测结果表明该探针对GGT的检测具有高度专一性,且反应后荧光发射谱的红移增加了检测的准确性。
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