短杆菌BH对苄嘧磺隆污染土壤的生物修复及生态学效应

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磺酰脲类除草剂的推广应用已有20多年的历史,该类除草剂的开发和应用对农药的发展和农业生产都起到了积极的作用。但是,农药的大量使用,对环境有着巨大的潜在危害。利用微生物降解农药的生物修复技术,具有快速、安全、费用低廉的优点。本论文利用从土壤中分离得到的一株高效降解苄嘧磺隆的短杆菌BH菌株,在前期研究的基础上,使用BH菌株对模拟苄嘧磺隆污染的土壤环境进行了生物修复实验。分析苄嘧磺隆及其降解菌的施用对土壤微生物、土壤酶的生态毒理效应,为该类除草剂的快速降解和污染土壤的生物修复提供科学依据。主要研究结果如下:在实验室条件下模拟稻田土壤环境,研究短杆菌BH的加入对除草剂苄嘧磺隆的降解影响发现,BH的加入对苄嘧磺隆降解有很强的促进作用,能明显提高土壤中苄嘧磺隆的降解率。对照土壤中苄嘧磺隆的降解十分缓慢,在施用除草剂14d后,农药残留量仍然维持在80%以上;添加了降解菌BH的土壤中,绝大部分苄嘧磺隆被降解,浓度降低到12%左右。苄嘧磺隆田间普遍施用量为0.12mg·kg-1(干土),而本实验中浓度范围为0.08—0.4mg·kg-1,不同浓度下BH菌株均有降解效果。在添加了BH菌株的土壤中,苄嘧磺隆2周内可快速降解80%,随着土壤中营养物质的消耗,14d天后降解速率逐渐缓慢。采用传统方法研究了苄嘧磺隆及其降解菌对水田土壤酶脲酶、蔗糖酶、蛋白酶、过氧化氢酶活性的影响。四种土壤酶对农药和降解菌具有各自不同的反应。土壤脲酶受苄嘧磺隆作用后,培养第4d和21d出现两次刺激作用,其它时间和对照水平无显著区别;苄嘧磺隆对蔗糖酶和过氧化氢酶具有抑制作用,尤其过氧化氢酶受到强烈抑制;这三种土壤酶活性在施用降解菌BH的土样里与空白对照接近。蛋白酶活性在含苄嘧磺隆的土壤中表现出先刺激后抑制的变化规律,施加BH菌株的土样中蛋白酶活性始终呈抑制趋势。在实验室条件下,通过活菌计数法及最大或然值法系统地研究了苄嘧磺隆及其降解菌对稻田土壤中细菌、真菌、放线菌三大类好氧微生物,以及氨化细菌、硝化细菌、好氧固氮菌、好氧纤维素分解菌等微生物种群数量的影响及其动态变化过程。实验结果表明:苄嘧磺隆以4μg·g-1(干土)施入土壤后对各种微生物有一定影响,降解菌的使用对这一效应有所缓解。总体上讲,苄嘧磺隆促进了细菌的生长,BH菌株对细菌总数无太大影响,农药被降解后才表现出抑制作用。苄嘧磺隆能刺激放线菌数量的增加,短杆菌BH的施用对放线菌有抑制作用;与放线菌的生长变化相反,苄嘧磺隆施用时真菌数量受到抑制,但BH菌株却具有刺激性。试验中,不同好氧细菌种群数量变化各不相同。在培养初始阶段苄嘧磺隆对好氧固氮细菌表现为刺激作用,后期为一定程度的抑制;好氧纤维素分解菌对苄嘧磺隆比较敏感,抑制现象持续整个试验过程,BH菌株作用降解苄嘧磺隆后基本去除这些效应。苄嘧磺隆能刺激氨化细菌的生长,而降解菌的施用对氨化细菌的生长有明显的抑制作用。
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