【摘 要】
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①目的:运用基于SELDI(Surface Enhanced Laser Desorption/Ionization)时间飞行质谱仪和配套的蛋白质芯片技术检测体外培养的肝癌细胞株与正常肝细胞株蛋白质的差异表达,从
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①目的:运用基于SELDI(Surface Enhanced Laser Desorption/Ionization)时间飞行质谱仪和配套的蛋白质芯片技术检测体外培养的肝癌细胞株与正常肝细胞株蛋白质的差异表达,从而为进一步研究肝癌的发病机理奠定基础。②方法:常规培养正常肝细胞株(LO2)和肝癌细胞株(HEPG2),在细胞生长状态良好时收获细胞,加入细胞裂解液裂解。裂解上清蛋白定量后应用IMAC3(固定金属亲和)和WCX2(弱阳离子交换)芯片,SELDI-TOF-MS技术检测两种细胞蛋白质组学的差异。③结果:体外培养的肝癌细胞株与正常肝细胞株的蛋白质存在差异表达,共有20个蛋白表达水平发生变化。IMAC3芯片发现差异峰7个,其中7979,8492,13428,15940 Da在肝癌细胞中表达增高,而8103,10160,11304 Da表达降低;WCX2芯片发现差异峰14个,其中7517,7945,7979Da在肝癌细胞中表达增高,5061,5551,5818,8428,10100,10312,11081,11621,11662,11830,12772 Da表达降低。7979Da蛋白峰可同时被IMAC3及WCX2两种芯片铺获,而且11081Da蛋白峰符合钙结合蛋白S100A10,它可能与p36作用而参与肝癌的发生。④结论:SELDI蛋白芯片技术检测肝癌细胞株与正常肝细胞株蛋白质的差异表达方法简便,敏感性高,重复性好,从而为从蛋白质水平研究肝癌的发病机理及新的治疗靶位的寻找奠定了一定的基础。
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