山药块茎多糖生物活性及其机理的研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 9次 | 上传用户:missyouangle
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本试验拟从山药粗多糖抗氧化性、果蝇生理特性、果蝇体内抗氧化活性、抑菌效果及免疫活性5个层面加以研究山药块茎多糖生物活性功能。试验以刚采收的山药块茎为材料,采用水提醇沉的方法提取山药粗多糖供试验使用。①以O2-自由基、ABTS自由基、DPPH自由基和还原力为指标测定粗多糖的体外抗氧化性。②将山药粗多糖按0.1%,0.3%,0.5%,1.0%和1.5%质量比添加到果蝇培养基中作为5个不同浓度梯度的试验组,零添加为对照组(CK)。将果蝇饲喂于不同试验组培养基中,测定果蝇寿命(半数寿命、平均寿命、最高寿命)、飞翔能力、性活力(潜伏期时间、交配时间)、繁殖力(F1代、F2代数量)和重量等各项生理指标,评价山药粗多糖对果蝇生理特性的影响。③将饲喂于基础培养基30d后转接到不同试验组中继续培养10d的果蝇制成组织匀浆,测定分析山药粗多糖对果蝇体内抗氧化活性的影响。④以常见供试菌种大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、青霉菌、根霉菌、黑曲霉菌为试验材料,测定粗多糖对真菌和细菌的抑制作用。⑤用不同浓度山药粗多糖细胞培养液(DMEM完全培养液)体外孵育小鼠巨噬细胞RAW264.7,观察山药粗多糖对小鼠巨噬细胞形态的影响,测定山药粗多糖对巨噬细胞活性、巨噬细胞分泌因子及代谢酶的影响。综合评价山药块茎粗多糖的生物活性功能及其作用机制。主要结果如下:1、通过试验测定山药粗多糖具有较强的体外抗氧化性:当山药块茎粗多糖浓度为12g/L时,对02-清除能力最大为0.53,多糖浓度为16 g/L时,对ABTS自由基的清除能力最大为0.55,多糖浓度为20 g/L时,对DPPH·自由基清除能力最大为0.77,且与Vc的清除能力相当,铁离子还原力最大为0.84。2、山药多糖能提高果蝇的寿命、飞翔能力、性活力、繁殖力和增加果蝇重量3、山药粗多糖均能增强果蝇体内T-AOC、SOD、POD、CAT酶活性和降低MDA的含量,且不同浓度梯度的山药粗多糖对果蝇的作用效果不同。4、山药多糖对青霉和黑曲霉的抑菌效果达到31.25%和22.56%,对枯草芽孢杆菌的抑菌率为34.55%,金黄色葡萄球菌的抑菌率为41.42%,大肠杆菌的抑菌率为21.33%,对细菌、真菌均有不同程度的抑制作用。5、通过用不同浓度的山药粗多糖DMEM完全培养液对巨噬细胞RAW264.7体外培养,试验结果得出,山药粗多糖能维持和增强巨噬细胞的活性,提高分泌因子NO的含量和溶解酶酸性磷酸酶的活性。山药粗多糖能抑制由LPS构建细胞炎症模型中巨噬细胞的活性。山药粗多糖具有双向调节巨噬细胞免疫活性的功能。
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