【摘 要】
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目的:探讨清心莲子汤对血管性痴呆大鼠认知功能改善作用的机制研究。方法选用雄性SD大鼠48只,随机分为6组,假手术组、模型组、清心莲子汤高剂量组、清心莲子汤中剂量组、清心莲子汤低剂量组和尼麦角林西药组,每组大鼠8只。除假手术组之外,均采用“两血管阻断+硝普钠降压法”建立VD模型,给药4周。假手术组给予生理盐水5 ml/kg、模型组给予生理盐水5 ml/kg、尼麦角林组(西药组)给予尼麦角林溶液0.5
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目的:探讨清心莲子汤对血管性痴呆大鼠认知功能改善作用的机制研究。方法选用雄性SD大鼠48只,随机分为6组,假手术组、模型组、清心莲子汤高剂量组、清心莲子汤中剂量组、清心莲子汤低剂量组和尼麦角林西药组,每组大鼠8只。除假手术组之外,均采用“两血管阻断+硝普钠降压法”建立VD模型,给药4周。假手术组给予生理盐水5 ml/kg、模型组给予生理盐水5 ml/kg、尼麦角林组(西药组)给予尼麦角林溶液0.5 mg/kg、清心莲子汤高剂量组2 g/kg、清心莲子汤中剂量组1g/kg、清心莲子汤低剂量组0.5 g/kg,均灌胃给药。最后五天通过Morris水迷宫检测大鼠学习与记忆能力及行为学改变;4%PFA灌流固定后取海马组织制作石蜡切片,应用HE染色法观察大鼠海马区病理形态学变化并对神经元数目进行定量分析;用酶联免疫吸附法(Enzyme-LinkedImmunosorbent Assay,ELISA)检测大鼠血清中乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AchE)、Bcl-2相关 X 蛋白(Bcl-2 Associated X Protein,Bax)以及 B 淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),脑组织中超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD),丙二醛(Malonydialdehyde,MDA),谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione Peroxidase,GSH-PX)的水平进行检测;应用原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率。结果:Morris水迷宫实验表明,模型组与假手术组相比,上台潜伏期明显延长,在学习记忆能力与空间探索能力均有统计学意义(P<0.05),特别是在第二天显著延长(P<0.05),并且在第三天和第四天有进一步的延长(P<0.01)。清心莲子汤低剂量组与中剂量组与模型组比较上台潜伏期有明显缩短(P<0.05)。清心莲子汤高剂量组和西药组与模型组相比,上台潜伏期在第三天有明显缩短(P<0.05),在第四天进一步缩短(P<0.01)。大鼠海马区病理切片HE染色结果显示假手术组细胞排列整齐,大小均匀,个别部位有大小不等的空泡存在。模型组海马结构明显变薄,细胞排列松散,神经元大部分胞体皱缩、深染,部分神经元胞体变形。清心莲子汤低剂量组、中剂量组、高剂量组和西药组与模型组比较,低剂量组有核深染的现象:中剂量组个别细胞存在核深染现象之外,海马神经元排列松散:高剂量组与西药组海马结构清晰,神经元细胞大小均一,排列整齐,基本恢复到正常水平。ELISA实验结果显示模型组与假手术组相比,AchE、Bax、MDA含量显著升高(P<0.01),清心莲子汤高剂量组与西药组与模型组比较可显著降低含量(P<0.01);Bcl-2、SOD、GSH-Px含量模型组与假手术组比较显著降低(P<0.01),这三种含量在清心莲子汤高剂量组和西药组与模型组比较显著升高(P<0.01)。TUNEL染色及海马CAI区细胞凋亡计数,模型组与假手术组比较有统计学意义(P<0.01)。清心莲子汤高剂量组、西药组与模型组比较有统计学意义(P<0.01)。清心莲子汤高剂量组与西药组无统计学意义(P>0.05)。结论:清心莲子汤能够通过抑制VD大鼠血清中AchE活性,降低Bax、MDA,提高Bcl-2、SOD、GSH-Px含量,改善VD大鼠海马区神经细胞的数量和形态,抑制海马体CA1区神经元细胞的凋亡从而对VD大鼠的认知能力起到改善和保护作用。
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